[发明专利]一种诱导牙髓干细胞向心肌样细胞分化的方法

权利要求书

1.一种诱导牙髓干细胞向心肌样细胞分化的组合物，包括5-氮杂胞苷和PFT-a。

2.根据权利要求1所述的组合物，所述5-氮杂胞苷与所述PFT-a的摩尔比为1:1.5～1:5。

3.根据权利要求1所述的组合物，所述5-氮杂胞苷与所述PFT-a的摩尔比为1:1.5～1:2。

4.一种诱导牙髓干细胞向心肌样细胞分化的方法，牙髓干细胞预培养后更换含FBS和权利要求1-3任意一项所述组合物的DMEM/F12培养基诱导培养，然后更换含FBS的DMEM/F12培养基维持培养。

5.根据权利要求4所述的方法，所述预培养为牙髓干细胞接种于放有多聚赖氨酸处理的无菌盖玻片的培养板中，加入含FBS和EGF的DMEM/F12培养基，静置培养。

6.根据权利要求5所述的方法，所述牙髓干细胞为第3-5代牙髓干细胞；所述接种密度为1-5×10⁴cell/mL；所述含FBS和EGF的DMEM/F12培养基中FBS体积为10％，所述EGF的浓度为10ng/ml；所述静置培养具体为37℃、5％CO₂、饱和湿度静置培养24h。

7.根据权利要求4所述的方法，所述诱导培养的培养基中为所述FBS体积为10％，所述5-氮杂胞苷的浓度为5μmol/L-15μmol/L，所述PFT-α的浓度为10μmol/L-25μmol/L。

8.根据权利要求4所述的方法，所述诱导培养的条件为37℃、5％CO₂、饱和湿度诱导培养24h。

9.根据权利要求4所述的方法，所述维持培养的培养基中所述FBS体积为15％。

10.根据权利要求4所述的方法，所述维持培养的条件为37℃、5％CO₂、饱和湿度维持培养4周，每隔2-3天更换新的培养液。