[发明专利]一种胸腺肽的制备方法

说明书

本发明涉及动物胸腺的深加工技术领域，尤其涉及一种胸腺肽的制备方法。该方法采用新鲜牲畜胸腺为主要原料，经过前处理、酶解、固液分离、脱脂纯化、纳滤、浓缩纯化，得到胸腺肽的浓缩液。该浓缩液可经冻干后即得到冻干产品。本发明方法生产周期短、成本低、对环境无污染，而且所得产品安全性高，纯度高、产品活性高、分子量可控，可广泛应用于食品、特医食品、保健品、药品等领域。

技术领域

本发明涉及动物胸腺的深加工技术领域，尤其涉及一种胸腺肽的制备方法。

背景技术

胸腺不仅是免疫器官，也是内分泌器官，是淋巴细胞的源泉，不仅是T细胞分化的场所，也有B细胞存在，在动物幼年早期发挥了重要的免疫作用。近年来的研究资料中提出，成人胸腺有助于T细胞的重建。在治疗获得性免疫缺陷疾病患者抗逆转录病毒过程中，增加的幼稚淋巴细胞大部分是从胸腺释放的。胸腺可分泌胸腺素(包括胸腺素α1与胸腺素β4)和促胸腺生成素，胸腺素α1是一种免疫活性肽，主要作用于胸腺细胞成熟的早期和晚期，可增加T细胞表面Th1，2和Lyt-1，2，3的表达，在体外影响TH细胞成熟。胸腺素α1在体外还可调节胸腺细胞末端的脱氧核苷酸转移酶水平，刺激巨噬细胞移动抑制因子(干扰素(interferon，IFN)、白细胞介素-2(interleukin-2，IL-2))及其受体产生。最近研究表明，小分子胸腺肽可刺激树突细胞的生长。

以动物胸腺为原料提取的胸腺肽和化学合成的胸腺五肽作为免疫调节药，具有调节和增强人体细胞免疫功能的作用，能促使有丝分裂原激活后的外周血中T淋巴细胞成熟，增加T细胞在各种抗原或致有丝分裂原激活后各种淋巴因子(如：α、γ干扰素、白介素2和白介素3)的分泌，增加T细胞上淋巴因子受体的水平。它同时通过对T4辅助细胞的激活作用来增强淋巴细胞反应。因此，本品具有调节和增强人体细胞免疫功能的作用。

在现有技术中，医药用胸腺肽的提纯度高，肽的种类单一，专门针对性治疗某一种疾病，其制作工艺为以氨基酸为原材料，用化学试剂进行人工嫁接、合成。因有化学试剂残留，不可避免的会对人体产生一定的毒副作用和不良反应。而从动物胸腺中提取胸腺肽的生产方法得到的产品分子量偏大，小分子多肽的提取效率低、吸收利用情况欠佳，而且多采用喷雾干燥，产品活性不好控制。

发明内容

针对现有生产胸腺肽的技术存在的化学试剂残留、产品分子量偏大、小分子多肽的提取效率低、的问题，本发明提供一种胸腺肽的制备方法。

为达到上述发明目的，本发明实施例采用了如下技术方案：

一种胸腺肽的制备方法，具体包括以下步骤：

步骤a、将新鲜牲畜胸腺进行液氮研磨，作为原料；

步骤b、向所述原料中加入相当于所述原料重量4～6倍的水，超声20～30min，再依次用微生物脂肪酶、内切蛋白酶、外切蛋白酶对所述原料进行酶解；其中所述外切蛋白酶为乳酸菌氨肽酶；

步骤c、固液分离，将所得液体进行脱脂纯化，纳滤，浓缩纯化。

本发明所提供的胸腺肽的制备方法中采用液氮研磨的方法对牲畜胸腺进行前处理，利用液氮的低温使组织变硬，脆性增加而易于磨碎，又能使胸腺组织中的成分不易被破坏或降解；再结合研磨，使胸腺细胞的结构被破坏，从而有利于胸腺肽的提取；液氮研磨后进行超声处理，进一步促进细胞中活性成分的释放，从而能够提高提取收率。

酶解先采用脂肪酶和内切蛋白酶共同进行酶解，脂肪酶分解了动物胸腺中的脂肪，让蛋白质成分从胸腺组织里分离出来，再由内切蛋白酶对组织分离出来的蛋白质进行酶解得到胸腺，从而提高了从原料中提取胸腺肽的提取率，即，从单位重量的胸腺中提取出更多胸腺肽；同时，脂肪酶减少了酶解液中的脂肪成分，使酶解液粘稠度降低，更容易过滤，使更多的胸腺肽进入下一工序，有利于提高胸腺肽的收率，即，终产品中的胸腺肽占胸腺中提取出的胸腺肽的比例。