[发明专利]一种抗罗非鱼免疫球蛋白IgM的单克隆抗体及其细胞株和应用有效

专利信息
申请号: 201811583818.5 申请日: 2018-12-24
公开(公告)号: CN109852588B 公开(公告)日: 2023-03-07
发明(设计)人: 曾伟伟;王英英;王庆;尹纪元;李莹莹;任燕;刘春;张德峰;石存斌;常藕勤 申请(专利权)人: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
主分类号: C12N5/20 分类号: C12N5/20;C07K16/42;G01N33/569;G01N33/577;C12R1/91
代理公司: 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 代理人: 谭英强
地址: 510380 广*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 罗非鱼 免疫球蛋白 igm 单克隆抗体 及其 细胞株 应用
【权利要求书】:

1.一株杂交瘤细胞株B6,于2018年11月30日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:C2018244。

2.一种抗罗非鱼的免疫球蛋白IgM的单克隆抗体,是由权利要求1所述的保藏编号为CCTCC NO:C2018244的杂交瘤细胞株分泌产生。

3.权利要求2所述的单克隆抗体在制备检测罗非鱼免疫球蛋白IgM产品中的应用。

4.权利要求2所述的单克隆抗体在制备检测罗非鱼湖病毒产品中的应用。

5.根据权利要求3或4所述的应用,其特征在于,所述产品包括试剂、试剂盒、芯片或试纸。

6.一种罗非鱼湖病毒的间接ELISA检测试剂盒,其特征在于,该试剂盒含有权利要求2所述的单克隆抗体。

7.根据权利要求6所述的罗非鱼湖病毒间接ELISA检测试剂盒,其特征在于,该试剂盒还包括:包被液、标准血清、洗涤液、HRP标记羊抗鼠抗体、TMB显色液、终止液、阳性对照品和阴性对照品。

8.一种罗非鱼湖病毒的间接ELISA检测方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)将样品加在包被有罗非鱼湖病毒的ELISA酶标板中;

(2)封板后孵育;

(3)洗涤样品;

(4)将权利要求2的单克隆抗体稀释后加到酶标板中;

(5)孵育、洗涤;

(6)稀释HRP标记羊抗鼠抗体,加到酶标板中;

(7)孵育、洗涤;

(8)加入酶的底物显色液,避光显色;

(9)加入酶的终止液终止显色反应,读取OD450nm吸光度值,进行结果判断;

上述方法不用于疾病的诊断与治疗。

9.根据权利要求8所述的检测方法,其特征在于,步骤(4)中所述的稀释倍数为2000~5000倍。

10.根据权利要求8所述的检测方法,其特征在于,步骤(2)、(5)、(7)中孵育条件为35~38℃孵育0.5~1.5h。

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