[发明专利]一种抗罗非鱼免疫球蛋白IgM的单克隆抗体及其细胞株和应用有效
申请号: | 201811583818.5 | 申请日: | 2018-12-24 |
公开(公告)号: | CN109852588B | 公开(公告)日: | 2023-03-07 |
发明(设计)人: | 曾伟伟;王英英;王庆;尹纪元;李莹莹;任燕;刘春;张德峰;石存斌;常藕勤 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院珠江水产研究所 |
主分类号: | C12N5/20 | 分类号: | C12N5/20;C07K16/42;G01N33/569;G01N33/577;C12R1/91 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 谭英强 |
地址: | 510380 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 罗非鱼 免疫球蛋白 igm 单克隆抗体 及其 细胞株 应用 | ||
1.一株杂交瘤细胞株B6,于2018年11月30日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:C2018244。
2.一种抗罗非鱼的免疫球蛋白IgM的单克隆抗体,是由权利要求1所述的保藏编号为CCTCC NO:C2018244的杂交瘤细胞株分泌产生。
3.权利要求2所述的单克隆抗体在制备检测罗非鱼免疫球蛋白IgM产品中的应用。
4.权利要求2所述的单克隆抗体在制备检测罗非鱼湖病毒产品中的应用。
5.根据权利要求3或4所述的应用,其特征在于,所述产品包括试剂、试剂盒、芯片或试纸。
6.一种罗非鱼湖病毒的间接ELISA检测试剂盒,其特征在于,该试剂盒含有权利要求2所述的单克隆抗体。
7.根据权利要求6所述的罗非鱼湖病毒间接ELISA检测试剂盒,其特征在于,该试剂盒还包括:包被液、标准血清、洗涤液、HRP标记羊抗鼠抗体、TMB显色液、终止液、阳性对照品和阴性对照品。
8.一种罗非鱼湖病毒的间接ELISA检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将样品加在包被有罗非鱼湖病毒的ELISA酶标板中;
(2)封板后孵育;
(3)洗涤样品;
(4)将权利要求2的单克隆抗体稀释后加到酶标板中;
(5)孵育、洗涤;
(6)稀释HRP标记羊抗鼠抗体,加到酶标板中;
(7)孵育、洗涤;
(8)加入酶的底物显色液,避光显色;
(9)加入酶的终止液终止显色反应,读取OD450nm吸光度值,进行结果判断;
上述方法不用于疾病的诊断与治疗。
9.根据权利要求8所述的检测方法,其特征在于,步骤(4)中所述的稀释倍数为2000~5000倍。
10.根据权利要求8所述的检测方法,其特征在于,步骤(2)、(5)、(7)中孵育条件为35~38℃孵育0.5~1.5h。
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