[发明专利]一种在宫颈癌检测中应用的试剂盒及其应用在审
| 申请号： | 201811555722.8 | 申请日： | 2018-12-18 |
| 公开（公告）号： | CN109554473A | 公开（公告）日： | 2019-04-02 |
| 发明（设计）人： | 李旭辉;张雷;郭书娟 | 申请（专利权）人： | 敬善生物科技江苏有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886 |
| 代理公司： | 北京汉鼎理利专利代理事务所(特殊普通合伙) 11618 | 代理人： | 潘满根 |
| 地址： | 226499 江苏省南*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 检测 宫颈癌 试剂盒 基因甲基化 应用 基因 甲基化DNA 区域比较 甲基化 锁核酸 外显子 阳性率 转录本 检出 引物 修饰 灵敏 上游 | ||
1.一种在宫颈癌检测中应用的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括检测MSF1基因甲基化的试剂，所述检测MSF1基因甲基化的试剂是检测MSF1基因第2种转录本NM_001113493.1的第一个外显子上游225～305bp处的CpG岛区段甲基化的试剂。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括样品DNA提取试剂、DNA甲基化修饰转化试剂以及基于荧光定量PCR方法检测MSF1基因甲基化的试剂，所述基于荧光定量PCR方法检测MSF1基因甲基化的试剂是检测MSF1基因第2种转录本NM_001113493.1的第一个外显子上游225～305bp处的CpG岛区段甲基化的试剂。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括用PCR方法检测内对照参考基因的试剂，所述内对照参考基因优选为ACTB基因；检测所述内参基因的试剂包括一对非甲基化位点扩增引物、一条检测非甲基化位点探针。
4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于：检测所述ACTB基因的试剂包括扩增ACTB基因引物和探针：
上游引物序列SEQ ID NO:2：ATAATAAAAAGGAGGTTGGAT；
下游引物序列SEQ ID NO:3：CTCCCRCAAAACAACCAC；
检测探针序列SEQ ID NO:4：CCACCTTACCCTAAACACTACAAC。
5.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述检测MSF1基因甲基化的试剂包括扩增MSF1基因的一对在5’端锁核酸修饰的引物和一条检测甲基化位点的探针：
上游引物序列SEQ ID NO:5：+TT+T+AGTTAGCGCGTAGGGTTC；
下游引物序列SEQ ID NO:6：+AA+C+TAATAAACAACGAATCGCG；
检测探针序列SEQ ID NO:7：ACGCCCCCGACGAAACC。
6.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述样品DNA来自于宫颈组织和/或宫颈细胞刷片DNA。
7.权利要求1-6任一所述的试剂盒在宫颈癌检测中的应用。
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