[发明专利]一种新鲜猪皮制备活性胶原蛋白肽的酶解工艺在审
申请号: | 201811359922.6 | 申请日: | 2018-11-15 |
公开(公告)号: | CN109321624A | 公开(公告)日: | 2019-02-12 |
发明(设计)人: | 陈政;陈旭;罗红平;石小培;高继康;赵志宏 | 申请(专利权)人: | 安徽嘉润生物科技有限责任公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K14/78 |
代理公司: | 北京和信华成知识产权代理事务所(普通合伙) 11390 | 代理人: | 胡剑辉 |
地址: | 232000 安徽省淮南*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 胶原蛋白酶 胶原蛋白肽 活性胶原蛋白 分离纯化 胶原蛋白 酶解工艺 新鲜猪皮 初筛 复筛 菌株 制备 发酵 反应条件控制 蛋白酶 高产 发酵培养基 复合酶制剂 复合酶解 工艺步骤 配伍使用 全细胞酶 生产效率 小分子量 优良菌株 原料配比 富含 胶原 酶解 投料 催化剂 动植物 吸收 | ||
1.一种新鲜猪皮制备活性胶原蛋白肽的酶解工艺,其特征在于:包括原料配比—投料—反应条件控制—复合酶制剂添加—反应等待工艺步骤,具体步骤如下:
(1)原料配比:根据需进行酶解的猪皮量,配制所需进行酶解反应的水的比例,猪皮和水的比例为1:1或者1:2,选取猪皮与水的比例为1:1作为优先原料配比;
(2)投料:将酶解反应釜的投料口打开,将比例为1:1的猪皮和水投入到酶解反应釜当中,酶解反应釜接通电源,通过电路控制酶解反应釜内部的搅拌桨转动,搅拌使猪皮和水在酶解反应釜内分布均匀,关闭投料口;
(3)反应条件控制:将锅炉加热产生的蒸汽接入反应釜夹层进行加热控制,加热温度控制在50℃—60℃之间,并进行保温处理,温度小于50℃时进行加温,温度大于60℃时停止加温;
(4)复合酶制剂添加:根据投入的猪皮量,制备占猪皮质量百分比为0.15%—0.3%的特异性胶原蛋白酶和普通动植物提取的蛋白酶,控制特异性胶原蛋白酶和普通动植物提取的蛋白酶比例为2:1,将所制备的特异性胶原蛋白酶和普通动植物提取的蛋白酶配伍,通过投料口投入,再次进行步骤(2)的搅拌操作,控制pH值在5-7之间;
(5)反应等待:酶解反应釜持续保温,控制釜内反应时间为4h—6h,反应时长达到4h不超过6h时间段,将酶解反应釜断电,选择关闭。
2.根据权利要求1所述的一种新鲜猪皮制备活性胶原蛋白肽的酶解工艺,其特征在于:步骤(1)所述的水为纯化水,所述的猪皮均经过切条、脱脂和清洗处理。
3.根据权利要求1所述的一种新鲜猪皮制备活性胶原蛋白肽的酶解工艺,其特征在于:步骤(2)所述的搅拌桨周边圆滑,选取搪瓷作为搅拌桨主要材料,搅拌桨转速范围为60r/min~120r/min。
4.根据权利要求1所述的一种新鲜猪皮制备活性胶原蛋白肽的酶解工艺,其特征在于:步骤(2)所述的酶解反应釜内部设置有夹层,可通蒸汽或冷却循环水,外釜体设置有保温层,保温层填充珍珠棉、岩棉或聚氨酯浇注发泡。
5.根据权利要求1所述的一种新鲜猪皮制备活性胶原蛋白肽的酶解工艺,其特征在于:步骤(4)所述特异性胶原蛋白酶的制备流程如下:
S1.产胶原蛋白酶株群:取等样的土样、水样和皮样,对取样品进行富集操作,对富集样品进行初筛,去除不产目标产物的微生物,再对富集样品进行复筛,挑选出高产菌株,获得产胶原蛋白酶菌株;
S2.发酵产胶原蛋白酶:对S1复筛获得的产胶原蛋白酶菌株进行优化处理,再进行培养条件优化,对优化处理的菌株进行菌种鉴定保藏,优化菌株进行发酵,产胶原蛋白酶菌株发酵产生胶原蛋白酶,获得特异性胶原蛋白酶。
6.根据权利要求5所述的一种新鲜猪皮制备活性胶原蛋白肽的酶解工艺,其特征在于:所述S1中初筛和复筛的温度均控制在35℃,所述S2中优化处理温度控制在30℃,优化条件包括碳源、氮源的添加,接种量、pH值考察,无机盐添加和发酵时间考察。
7.根据权利要求1所述的一种新鲜猪皮制备活性胶原蛋白肽的酶解工艺,其特征在于:步骤(5)所述的釜内反应时间通过定时器进行控制,釜内真空度为0Pa。
8.根据权利要求5所述的一种新鲜猪皮制备活性胶原蛋白肽的酶解工艺,其特征在于:所述S2中菌种鉴定保藏包括形态特征鉴定和理化特性鉴定,保藏条件温度控制在恒温2℃-20℃之间。
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