[发明专利]一种制备人参稀有皂苷Rk3

说明书

本发明涉及生物工程技术领域，公开了一种制备人参稀有皂苷Rk₃的方法。本发明所述方法先制备冬虫夏草种子液，然后接种至灭菌后的原人参药材上培养至长满菌丝，将长满菌丝的原人参药材取出，干燥，获得含有人参稀有皂苷Rk₃的初级产物，分离纯化初级产物获得人参稀有皂苷Rk₃。本发明将药用真菌冬虫夏草与原人参药材联合发酵生产人参皂苷Rk₃，由此确定了能够制备高含量人参皂苷Rk₃的简便工艺，相比原人参药材中人参皂苷Rk₃含量提高了22倍。本发明方法能有效直接利用原人参药材，减少前期提取纯化步骤，反应条件温和可控，Rk₃产量大，纯度高。

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种制备人参稀有皂苷Rk₃的方法。

背景技术

人参(Panax ginseng C.A.Meyer)为五加科多年生草本植物人参的根，自古有“百草之王”之称。人参的化学成分主要为人参皂苷、人参多糖等，成分复杂，生物活性广泛，药理作用独特，具有抗癌和抗肿瘤，调节中枢神经系统及心脑血管，改善消化系统促进代谢，提高免疫力，抗衰老以及益智等功效。

现今药理研究表明，人参稀有皂苷Rk₃对肝癌细胞有明显抑制作用，也可用于防治血管新生疾病，并对毛细血管扩张症也有较好疗效，然而原人参中人参稀有皂苷Rk₃含量很低，且因其结构比较复杂，利用现有的科学技术无法实现化学上的全合成，目前制备人参稀有皂苷Rk₃的方法多为化学高温高压裂解法、普通分离纯化法和人参三醇型皂苷生物转化法。但是，化学高温高压裂解法反应复杂、副反应多、反应条件难以控制；普通分离纯化法，提取效率低，无法得到大量人参稀有皂苷Rk₃；人参三醇型皂苷生物转化法，底物成本高，对人参总皂苷利用率低。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种制备人参稀有皂苷Rk₃的方法，使得所述方法能够以原人参药材为原料，获得高含量的人参稀有皂苷Rk₃。

为了实现上述发明目的，本发明提供了如下技术方案：

一种制备人参稀有皂苷Rk₃的方法，制备冬虫夏草种子液，然后接种至灭菌后的原人参药材上培养至长满菌丝(培养瓶瓶底长满菌丝)，将长满菌丝的原人参药材取出，干燥，获得含有人参稀有皂苷Rk₃的初级产物，分离纯化初级产物获得人参稀有皂苷Rk₃。

作为优选，所述制备冬虫夏草种子液为：

在菌种培养基中接种冬虫夏草菌种，恒温振荡培养至种子液浑浊黏稠呈淡黄色。其中，所述菌种培养基配方为：

葡萄糖1.9-2.1％，KH₂PO₄0.09-0.11％，MgSO₄0.09-0.11％，蛋白胨 0.45-0.55％，酵母粉0.18-0.22％，维生素B₁ 0.09-0.11％，余量水，pH自然(％为质量百分比)；

在本发明具体实施方式中，所述菌种培养基配方为：

葡萄糖2％，KH₂PO₄ 0.1％，MgSO₄ 0.1％，蛋白胨0.5％，酵母粉0.2％，维生素B₁0.1％，pH自然；

所述恒温振荡培养的条件优选为：150r/min，26±1℃，湿度60±1％。