[发明专利]一种免疫细胞的培养方法在审
申请号: | 201811245216.9 | 申请日: | 2018-10-24 |
公开(公告)号: | CN109207424A | 公开(公告)日: | 2019-01-15 |
发明(设计)人: | 郭金东;高全立;张成娟;李铁鹏 | 申请(专利权)人: | 河南省肿瘤医院 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783 |
代理公司: | 郑州先风专利代理有限公司 41127 | 代理人: | 王俊红 |
地址: | 450004 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 免疫细胞 培养液 培养袋 细胞 外周血单个核细胞 细胞接种 培养基 培养瓶 扩增 增殖 采集 节约 收获 | ||
1.一种免疫细胞的培养方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)采集外周血单个核细胞;
(2)将上述细胞接种于含有培养基的培养瓶中进行培养;
(3)将经过上述步骤(2)培养后的细胞导入培养袋中,其中培养液的体积小于培养袋的容积;
(4)收获免疫细胞。
2.根据权利要求1所述免疫细胞的培养方法,其特征在于,上述步骤(3)中培养液的体积和培养袋容积的比例为0.42-0.55:1。
3.根据权利要求1所述免疫细胞的培养方法,其特征在于,上述步骤(2)中的细胞接种于培养瓶中后放于37℃,饱和湿度,5%CO2培养箱中培养3-5天。
4.根据权利要求1所述免疫细胞的培养方法,其特征在于,上述步骤(2)中的培养瓶中以及步骤(3)的培养液中均添加有细胞因子。
5.根据权利要求1所述免疫细胞的培养方法,其特征在于,上述步骤(3)中将细胞导入培养袋,补充培养液,继续培养至第2-7天后进行扩大培养。
6.根据权利要求5所述免疫细胞的培养方法,其特征在于,将上述步骤(3)中进行扩大培养的细胞培养至第4-14天后进行离心,洗涤后即得免疫细胞。
7.根据权利要求1所述免疫细胞的培养方法,其特征在于,所述免疫细胞为CIK细胞、TIL细胞、NK细胞中的一种。
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