[发明专利]γ-六溴环十二烷对映体植物毒性的评价方法

说明书

本发明涉及持久性有机污染物毒性评价技术领域，具体公开一种γ‑六溴环十二烷对映体植物毒性的评价方法，即将植物的种子和幼苗分别在不同浓度的γ‑六溴环十二烷对映体溶液中进行暴露，测定暴露后种子的发芽率，测定幼苗根部及地上部中抗坏血酸含量、谷胱甘肽含量以及丙二醛含量。本发明方法周期短，操作简单，通过测定种子萌发抑制率、抗坏血酸含量、谷胱甘肽含量以及丙二醛含量，能有效比较出(+)γ‑HBCD与(rac)γ‑HBCD对植物毒性的差异以及γ‑HBCD对不同植物的毒性水平。

技术领域

本发明涉及持久性有机污染物毒性评价技术领域，具体涉及一种γ-六溴环十二烷对映体植物毒性的评价方法。

背景技术

六溴环十二烷(HBCD)是一种新型溴代阻燃剂，由于其效果好、用量少被广泛应用于纺织业、电子产业及建筑业。HBCD可导致血清甲状腺激素浓度下降、引起肝组织病理学改变，并且具有致畸、致癌的潜力。2013年，斯德哥尔摩公约将其列入持久性有机污染物(POPs)受控名单中，HBCD在环境领域已备受关注。HBCD除了具有POPs持久性、生物积累性、高毒性以及远距离迁移性的特征外还具有手性特征。工业生产的技术级HBCD(tHBCD)是一种化学混合物，其中主要含有α-HBCD、β-HBCD和γ-HBCD三种异构体(其中以γ-HBCD为主，占75％-89％)，每一种异构体又分别含有一对对映体。

目前对HBCD毒性研究大多集中在细胞以及动物中，且研究多停留在结构异构体水平上的考察，有关HBCD对植物的毒性尤其在对映体水平上的毒性研究目前较少，导致对其环境风险评估存在偏差。植物是生态系统能量的生产者，研究HBCD对植物的毒性效应，更易于了解HBCD进入生态系统后所产生的影响，为进一步深入探讨HBCD的生态毒理奠定基础。

发明内容

针对现有技术对六溴环十二烷(HBCD)对映体对植物生理代谢的影响评估方法容易存在偏差等问题，本发明提供一种γ-HBCD对映体植物生理代谢毒性的评价方法，由于(+)γ-HBCD与(-)γ-HBCD相比更易在生物体中富集，且前期研究考察已发现(-)γ-HBCD对植物的毒性与空白相比差异不大，因此本发明方法用于评价(+)γ-HBCD与(rac)γ-HBCD对植物代谢的毒性大小。

为达到上述发明目的，本发明采用了如下的技术方案：

一种γ-HBCD对映体植物毒性的评价方法，其步骤为：将植物的种子和幼苗分别在不同浓度的γ-HBCD对映体溶液中进行暴露，测定暴露后种子的发芽率，测定幼苗根部及地上部中抗坏血酸含量、谷胱甘肽含量以及丙二醛含量。

优选地，所述γ-HBCD对映体溶液设置五个浓度梯度，分别为0.5、1.0、2.0、3.0和5.0μg·L^-1。

优选地，所述种子和幼苗在γ-HBCD对映体溶液中暴露的时间为3d。

进一步优选地，所述暴露过程中，每天光照14h，白天温度25℃，夜晚温度20℃。

优选地，所述种子胚根和胚芽鞘长度都超过种子长度的一半时即认为发芽。

优选地，所述幼苗为发芽4d后的幼苗。

优选地，所述幼苗根部和地上部分别加入三氯乙酸，冰浴研磨至匀浆状，离心，检测上清液中的抗坏血酸、谷胱甘肽和丙二醛的含量。

进一步优选地，所述离心是在4℃、5000xg下离心15min。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：