[发明专利]一种基于琼脂糖凝胶介质的全基因组扩增方法有效
申请号: | 201811207218.9 | 申请日: | 2018-10-17 |
公开(公告)号: | CN109439734B | 公开(公告)日: | 2022-01-28 |
发明(设计)人: | 涂景;苏奥;马靖原;黄梦婷;杨芳;陆祖宏 | 申请(专利权)人: | 东南大学 |
主分类号: | C12Q1/6844 | 分类号: | C12Q1/6844 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 柏尚春 |
地址: | 211102 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 琼脂 凝胶 介质 基因组 扩增 方法 | ||
1.一种基于琼脂糖凝胶介质的全基因组扩增方法,其特征在于,包括将多重链置换扩增反应体系置于琼脂糖凝胶中,采用具有链置换能力的核酸聚合酶和随机序列引物,在恒温的条件下,完成对目标基因组的全基因组扩增,提高其绝对质量,所述琼脂糖凝胶,是以琼脂糖为支持介质制备的凝胶,具有网状结构,琼脂糖的质量体积比在0.5%-5.0%之间。
2.根据权利要求1所述的基于琼脂糖凝胶介质的全基因组扩增方法,其特征在于,所述具有链置换能力的核酸聚合酶,是Φ29DNA聚合酶,Klenow DNA聚合酶或Bst DNA聚合酶。
3.根据权利要求1所述的基于琼脂糖凝胶介质的全基因组扩增方法,其特征在于,所述随机序列引物,其长度为5-40个碱基,其中包含一个或多个简并碱基。
4.根据权利要求1所述的基于琼脂糖凝胶介质的全基因组扩增方法,其特征在于,所述随机序列引物,为普通未修饰引物,或者为经过硫代修饰、硫酸化修饰或氨基修饰的修饰引物。
5.根据权利要求1所述的基于琼脂糖凝胶介质的全基因组扩增方法,其特征在于,所述目标基因组,为一种或多种人类、动物、植物或微生物的基因组,目标基因组的规模,为单细胞基因组或多细胞基因组。
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