[发明专利]一种基于细长反应腔的多重PCR扩增方法在审

专利信息
申请号: 201811207172.0 申请日: 2018-10-17
公开(公告)号: CN109385467A 公开(公告)日: 2019-02-26
发明(设计)人: 涂景;杨奕璇;陶宇涵;乔祎;陆祖宏 申请(专利权)人: 东南大学
主分类号: C12Q1/686 分类号: C12Q1/686
代理公司: 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 代理人: 郑立发
地址: 211102 *** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 多重PCR扩增 反应腔 微观反应 细长形 操作复杂度 发生装置 反应腔体 反应系统 复杂反应 核酸扩增 扩增反应 目标核酸 微量液体 物质交换 系统调试 相对独立 靶区域 微液滴 扩增 微腔 分隔 制备 精密 样本
【权利要求书】:

1.一种基于细长反应腔的多重PCR扩增方法,其特征在于,包括将多重PCR扩增反应体系注入细长形的反应腔中,完成对特定样本多个靶区域的核酸扩增。

2.根据权利要求1所述的基于细长反应腔的多重PCR扩增方法,其特征在于,所述多重PCR扩增,是采用核酸聚合酶和多对引物,在适宜的温度控制下,对目标样本的多个靶区域进行核酸扩增,提高核酸的绝对质量。

3.根据权利要求2所述的基于细长反应腔的多重PCR扩增方法,其特征在于,所述多对引物,引物对数量不小于2,引物对间为独立作用,或是相互协助作用,同一条引物出现在一个引物对中或多个引物对中。

4.根据权利要求2所述的基于细长反应腔的多重PCR扩增方法,其特征在于,所述多对引物,引物为普通未修饰引物,或者为经过化学基团修饰的引物,特别为经过硫代修饰、硫酸化修饰或氨基修饰的引物。

5.根据权利要求1所述的基于细长反应腔的多重PCR扩增方法,其特征在于,所述细长形的反应腔,反应腔中反应溶液所处的区域,区域总长度和反应腔内部平均横截面积的平方根之间的比值在5:1到2×106:1之间。

6.根据权利要求1所述的基于细长反应腔的多重PCR扩增方法,其特征在于,所述细长形的反应腔,反应腔中反应溶液所处的区域,反应腔内部的平均横截面积在25平方微米到4平方毫米之间。

7.根据权利要求1所述的基于细长反应腔的多重PCR扩增方法,其特征在于,所述细长形的反应腔,反应腔的横截面为圆形、椭圆形、正方形或长方形,反应腔各部分的横截面相同或者不相同。

8.根据权利要求1所述的基于细长反应腔的多重PCR扩增方法,其特征在于,所述细长形的反应腔,反应腔是塑料、玻璃或金属材质的微细管道,或者是通过微加工工艺在微流控芯片中制备的细长形流道。

9.根据权利要求1所述的基于细长反应腔的多重PCR扩增方法,其特征在于,所述多个靶区域,为来源于同一物种基因组的不同区域,或者来源于不同物种基因组的多个区域,或者其中一个、多个或全部靶区域来源于人工合成或改造的核酸序列。

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