[发明专利]高纯度未变性胶原蛋白及其制造方法

说明书

本发明提供一种高纯度未变性胶原蛋白及其制造方法，其利用酸及非胃蛋白酶(non‑pepsin protease)水解鸡胸骨及粗滤后，所述滤液无需经离心回溶处理，直接进行加盐处理及精滤处理，以在较短的制程时间内获得高纯度未变性胶原蛋白，其中高纯度未变性胶原蛋白的总胶原蛋白含量为60％以上，且含有至少50％的未变性第二型胶原蛋白。

技术领域

本发明关于一种胶原蛋白及其制造方法，特别是一种高纯度未变性胶原蛋白及其制造方法，其所述高纯度未变性胶原蛋白具有高未变性第二型胶原蛋白含量。

背景技术

第二型胶原蛋白为软骨的主要结构成分，并与其他型胶原蛋白和蛋白多糖等成分并存于软骨中，以支撑组织并具有吸收冲力的功效。由于第二型胶原蛋白具有良好的生物相容性，故常被应用于食品、医疗和美容等领域。

近来研究指出未变性第二型胶原蛋白(Undenatured type II collagen)对类风湿性关节炎具有显著的疗效。虽然市面上已有许多未变性第二型胶原蛋白的产品，但其在不同酸碱度溶液中的溶解度不佳、未变性第二型胶原蛋白的含量低且产品中的总胶原蛋白含量也低。

此外，在常见的制程中，常因加热或化学处理(例如酶处理)造成未变性第二型胶原蛋白降解而失去活性。再者，常见制程所使用的酶或其他试剂通常为非食品级，造成所制得的胶原蛋白产品的应用领域受到限制，制程时间也较长。特别是，常用于纯化胶原蛋白的胃蛋白酶，由于其来源复杂且不明确，目前在国内并未列入食品级酶中。

因此，目前亟需提出一种高纯度未变性胶原蛋白及其制造方法，以改善上述种种问题。

发明内容

本发明的一个方式在于提供一种高纯度未变性胶原蛋白的制造方法，其利用可制得高总胶原蛋白含量(相当于纯度)及高未变性第二型胶原蛋白含量(相当于活性)的胶原蛋白。

本发明的另一个方式在于提供一种高纯度未变性胶原蛋白，其使用上述的制造方法所制得。

根据本发明的上述方式，提出一种高纯度未变性胶原蛋白的制造方法。在一些实施例中，先提供鸡胸骨。接着，对鸡胸骨进行酸水解，以形成酸水解物。所述酸处理在0℃至7℃条件下进行至少30天。然后，将非胃蛋白酶加入酸水解物中进行酶水解，以形成酶水解物。所述非胃蛋白酶与鸡胸骨的重量比为1：60至1：100。之后，对所述酶水解物进行粗滤处理，以形成滤液。然后，对所述滤液进行加盐处理，以形成盐液。在所述加盐处理后，使用不同孔径的陶瓷膜，直接对盐液进行精滤处理，以获得所述高纯度未变性胶原蛋白。胶原蛋白中包含至少50％的未变性第二型胶原蛋白。

依据本发明的一些实施例，在获得胶原蛋白后，可对胶原蛋白进行低温干燥处理。

依据本发明的一些实施例，所述酸水解的步骤使用pH 1.5至2的醋酸来进行。

依据本发明的一些实施例，所述酶水解在12℃至36℃条件下进行8至72小时。

依据本发明的一些实施例，所述加盐处理的盐浓度为0.7M至1.1M。

依据本发明的一些实施例，所述精滤处理包含将盐液稀释为至少300公升的稀释液，以及以每分钟30公升至50公升的流速，将所述盐液通过复数个陶瓷膜，以去除分子量1至300kD的杂质。

依据本发明的一些实施例，所述精滤处理包含进行上述稀释步骤及上述通过复数个陶瓷膜的步骤的复数个循环达4至8天。

依据本发明的一些实施例，所述制造方法不包括在上述精滤处理前进行离心沉淀处理和回溶处理。

根据本发明的上述方式，提出一种高纯度未变性胶原蛋白。在一些实施例中，所述高纯度未变性胶原蛋白使用上述制造方法所制得。所述高纯度未变性胶原蛋白的总胶原蛋白含量为至少60％，且至少50％的高纯度未变性胶原蛋白为未变性第二型胶原蛋白。