[发明专利]用于检测鲤春病毒的特异性引物对、探针、检测试剂盒有效
申请号: | 201811066843.6 | 申请日: | 2018-09-13 |
公开(公告)号: | CN108998576B | 公开(公告)日: | 2021-05-25 |
发明(设计)人: | 陈静;高山珊;方苹;贡成良;于继彬 | 申请(专利权)人: | 江苏省渔业技术推广中心;苏州先达基因科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 王艳 |
地址: | 210000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 病毒 特异性 引物 探针 试剂盒 | ||
1.一种用于检测鲤春病毒的特异性引物对,其特征在于,所述特异性引物对包括上游引物SEQ ID NO:1和下游引物SEQ ID NO:2;或所述特异性引物对包括上游引物SEQ ID NO:3和下游引物SEQ ID NO:4;或所述特异性引物对包括上游引物SEQ ID NO:5和下游引物SEQID NO:6;或所述特异性引物对包括上游引物SEQ ID NO:7和下游引物SEQ ID NO:8所示。
2.与权利要求1所述的引物对配合使用的探针,其特征在于,与特异性引物对SEQ IDNO:1和SEQ ID NO:2配合使用的探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:9 所示,与引物对SEQ IDNO:3和SEQ ID NO:4配合使用的探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:9所示,与引物对SEQ IDNO:5和SEQ ID NO:6配合使用的探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:10所示,与引物对SEQ IDNO:7和SEQ ID NO:8配合使用的探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:11所示。
3.根据权利要求2所述的探针,其特征在于,所述探针为荧光染料标记的探针,所述荧光染料为SYTO-13,SYTO-82, FAM,FITC,SYBR Green I,SYTO-13,SYTO-82,VIC,HEX,JOE,TAMRA,TET,Cy3 ,ROX,TEXAS-Red或Cy5中的一种。
4.权利要求1所述的特异性引物对、权利要求2所述的探针在制备鲤春病毒检测或诊断试剂盒中的应用。
5.一种鲤春病毒的检测试剂盒,其特征在于,所述鲤春病毒的检测试剂盒包括权利要求1所述的引物对和权利要求2~3任一项所述的探针。
6.根据权利要求5所述的鲤春病毒的检测试剂盒,其特征在于,所述的检测试剂盒还包括:重组酶、聚合酶、单链DNA结合蛋白、核酸酶、dNTP、拥挤试剂、重组加载蛋白、能量系统和盐离子。
7.根据权利要求6所述的鲤春病毒的检测试剂盒,其特征在于,所述重组酶选自噬菌体UvsX 蛋白,大肠杆菌recA蛋白的任一种或一种以上的组合。
8.根据权利要求6所述的鲤春病毒的检测试剂盒,其特征在于,所述聚合酶选自klenow聚合酶,bsu聚合酶或phi29聚合酶及其这些酶的突变体或大片段的任一种或一种以上的组合。
9.根据权利要求6所述的鲤春病毒的检测试剂盒,其特征在于,所述核酸酶选自核酸外切酶III,核酸内切酶IV的任一种或一种以上的组合。
10.根据权利要求6所述的鲤春病毒的检测试剂盒,其特征在于,所述拥挤试剂选自聚乙二醇,聚乙烯醇,右旋糖酐或聚蔗糖的一种或一种以上的组合,所述聚乙二醇选自PEG1450,PEG3000,PEG8000,PEG10000,PEG14000, PEG20000,PEG25000,PEG30000,PEG35000或PEG40000中的一种或几种。
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