[发明专利]一种人类白细胞HLA-B*27基因分型引物组及应用

说明书

本发明公开了一种人类白细胞HLA‑B*27基因分型引物组，包括分别检测血型A,A₂₀₅，B和O_(261G缺失)，O₁，O₂的等位基因引物对AR和AF；A₂R和A₂F；BR和BF；0_TR和O_TF；O₁R和O₁F；O₂R和O₂F及内参引物对；本发明设计的等位基因引物组动力高，特异性强，同时根据人类白蛋白基因的保守片段设计内参引物对内参1R和内参1F与内参2R和内参2F，每个检测孔内等位基因引物对的对数为2～4对，并同时含有2对内参，确保PCR扩增质量与正确性，进而确保了试验结果的可靠性。

技术领域

本发明涉及基因诊断制品技术领域，具体为一种人类白细胞HLA-B*27基因分型引物组及应用。

背景技术

HLA(human leukocyte antigen)，即人类白细胞抗原是人体重要的免疫遗传体系，也是目前所知人体最复杂的多态系统。HLA作为抗原刺激机体产生相应抗体的性质或分子结构，这是器官移植产生排异反应的主要原因，也是血清学和细胞学配型的基础。HLA有I类、II类、III类基因，HLA-B*是I 类HLA基因的三个位点(HLA-A*,HLA-B*,HLA-C*)之一。而HLA-B27基因即人类HLA-I类分子B位点上的等位基因，位于第6号染色体短竹上，由8个外显子和7个内含子组织，编码分子质量为43KD的糖蛋白。该基因主要表达在机体所有的有核细胞表面，尤其是淋巴细胞表面有丰富的含量。

强直性脊椎炎(Ankylosing Spondylitis AS)是以散韶关节和脊柱附着点炎症为主要症状的疾病。该病以脊柱为主要病变部位的慢性病，累及K关节，引起脊柱强直和纤维化，造成不同程度眼、肺、肌肉、骨骼病变，属自身免疫性疾病。据资料统计，我国约有400余万强直性脊柱炎病人。它最为显著的变化为关节的纤维化和骨性强直。若不及时诊治，很容易导致患者关节畸形，终身痛苦，故有“不死的癌症’之称。

AS具有家族遗传现象，HLA-B*27诊断能够提示高危人群，及早进行筛查、诊治。根据中华骨髓库公布HLA-B等位基因4码中分辨频率共记录244种亚型，其中B27亚型共15种,占人群频率1.98％，以HLA-B27:04最高，占B27 等位基因47.8％；其次为HLA-B27:05，占B27等位基因38.7％。在泰国与中国台湾地区研究中，强直性脊柱炎(AS)患者高达91％为HLA-B*27:04等位基因，在高加索人的研究则以HLA-B*27:05为主。目前中国的文献中指出 HLA-B*27:04与HLA-B*27:05为强直性脊柱炎主要型别(占90％以上)， HLA-B*27:04较多于HLA-B*27:05。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有的HLA-B*27的检测技术的正确性需要进一步提高的缺陷，提供一种人类白细胞HLA-B*27基因分型引物组及应用。

为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案：

一种人类白细胞HLA-B*27基因分型引物组，其特征在于，包括分别检测血型B27T,B2705，B2704和B2706的等位基因引物对LB27TF和LB27TR； LB2705F和LB2705R；LB2706F1和LB2706R1；LB2706F2和LB2706R2和内参引物对；

所述LB27TF和LB27TR的序列分别为GTGGGCTACGTGGACGACACGCTGTTC和GTCAGTCTGTGCCTTGGCCTTGCAGATC；

所述LB2705F和LB2705R的序列分别为GGCTCCCACTCCATGAGGTATTTCCA和CGGAGCAGGGTCCGCAGGTCCTC；