本发明公开了一种荧光染料与电泳PCR双用缓冲液，包括以下各组分：甲酚红钠(1.5～2.5)*10^‑5g/L、PCR Buffer 71～75％、dNTP 5.5～6.5％、甘油4～5％、SYBR Green Ⅰ 0.008～0.015％和灭菌去离子水15～20％。本发明的双用染剂的具有不同检测平台的通用性，可适用不同厂牌Taq酶，至少确认可用于Invitrogen、Promega、Bioer Taq与pfu Taq，可同时用于Syber green I real‑time PCR扩增或一般PCR扩增，并且荧光PCR扩增反应后可直接进行琼脂糖电泳执行产物回收或判读，不需额外加入染色剂即可电泳，荧光PCR检测后仍可进行电泳检测，不需额外加入染色剂。缓冲液配方可以简化电泳操作时需要与染料稀释与加入核酸染剂的两个过程，特别是省略传统核酸染料EtBr等致癌物，大大增加试验的安全性。
本发明公开了一种人类KIR基因分型检测引物组，包括SEQ ID No.1‑32所示的引物16对引物；本发明基于聚合酶链式反应(荧光PCR)反应原理，引物3'末端的第一个碱基与等位基因特异性碱基互补，特异性引物对仅扩增与其相匹配的等位基因；引物设计依据美国国家生物技术信息中心(NCBI)建立的DNA序列数据库(Genbank)中的血型抗原基因突变数据库(dbRBC)公开的人类基因序列，选择适合的特异性突变点设计引物；PCR掺入染料法以荧光染料通过掺入DNA的扩增产物来表示DNA扩增的效果。在扩增后进行熔解曲线分析。通过熔解曲线分析能确认目的产物是否被特异性扩增，以此来判断等位基因。
本发明公开了一种人类RhD血型基因分型检测引物组，包括SEQ ID No.1‑32所示的引物16对引物；本发明基于聚合酶链式反应(荧光PCR)反应原理，引物3'末端的第一个碱基与等位基因特异性碱基互补，特异性引物对仅扩增与其相匹配的等位基因；引物设计依据美国国家生物技术信息中心(NCBI)建立的DNA序列数据库(Genbank)中的血型抗原基因突变数据库(dbRBC)公开的人类基因序列，选择适合的特异性突变点设计引物；PCR掺入染料法以荧光染料通过掺入DNA的扩增产物来表示DNA扩增的效果。在扩增后进行熔解曲线分析。通过熔解曲线分析能确认目的产物是否被特异性扩增，以此来判断等位基因。
