[发明专利]一种马铃薯Y病毒弱毒株、载体、制备方法及其应用

权利要求书

1.一种马铃薯Y病毒弱毒株系，其特征在于，马铃薯Y病毒弱毒株系中，HC-Pro基因的氨基酸序列的第182位的赖氨酸突变为精氨酸。

2.根据权利要求1所述的一种马铃薯Y病毒弱毒株系，其特征在于，突变前，HC-Pro的核苷酸序列如Seq ID No.3所示，HC-Pro的氨基酸序列如Seq ID No.4所示。

3.一种含有如权利要求1或2所述的马铃薯Y病毒弱毒株系基因组的载体。

4.根据权利要求3所述的载体，其特征在于，载体以pCAMBIA0390为基础，插入马铃薯Y病毒弱毒株系基因组，且HC-Pro基因的氨基酸序列的第182位的赖氨酸突变为精氨酸。

5.一种如权利要求1或2所述的一种马铃薯Y病毒弱毒株系的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)利用PCR定点突变将马铃薯Y病毒的辅助成分-蛋白酶HC-Pro的第182位氨基酸赖氨酸突变为精氨酸；

(2)筛选弱毒株系，获得马铃薯Y病毒弱毒株系。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，筛选获得弱毒株系后，通过农杆菌浸润法将获得的马铃薯Y病毒弱毒株系接种到寄主植物普通烟，发现弱毒株系的致病力显著下降。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，在接种马铃薯Y病毒弱毒株系到寄主植物普通烟后第15天接种马铃薯Y病毒强毒株系，测定交叉保护效果，发现弱毒株系可有效抵御强毒株系的侵染。

8.一种含有如权利要求1或2所述的一种马铃薯Y病毒弱毒株系，或者权利要求3或4所述的载体的重组菌。

9.根据权利要求8所述的重组菌，其特征在于，所述的重组菌包括重组的农杆菌，农杆菌中转入含有马铃薯Y病毒弱毒株系的载体。

10.一种如权利要求1或2所述的一种马铃薯Y病毒弱毒株系，或者权利要求3或4所述的载体在防治马铃薯Y病毒强毒株系侵染植物方面的应用；

优选的，所述的植物为双子叶植物；

优选的，所述的植物为烟草。