[发明专利]一种肌红蛋白检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明公开了一种肌红蛋白检测试剂盒及其制备方法，包括R1试剂和R2试剂，所述R1试剂包括二甲胂酸缓冲液、肌红蛋白抗体的纳米磁微粒、酶标记的肌红蛋白抗体、肌红蛋白校准品，牛血清白蛋白、蔗糖、柠檬酸三钠、氯化钾、乙二胺四乙酸、4,4'‑二氨基‑3,3'‑二甲基联苯；所述R2试剂包括肌红蛋白抗体致敏聚苯乙烯胶乳颗粒和三羟甲基氨基甲烷缓冲液；制成一种肌红蛋白检测试剂盒，其具有快速灵敏、准确性好、特异性高、稳定性好的效果。

技术领域

本发明涉及一种肌红蛋白检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

肌红蛋白是哺乳动物细胞储存和分配氧的蛋白质，它是由一条多肽链和一个辅基血红素构成，相对分子质量为16 700，含153个氨基酸残基。

测定血清肌红蛋白肌红蛋白可作为急性心肌梗死(AMI)诊断的早期最灵敏的指标。但特异性差,骨骼肌损伤、创伤、肾功能衰竭等疾病,都可导致其升高。Myo阳性虽不能确诊AMI,但可用于早期排除AMI诊断的重要指标,如Myo阴性,则基本排除心肌梗死,还可用于再梗死的诊断,结合临床,如Myo重新升高,应考虑为再梗死或者梗死延展。

肌红蛋白主要检测的有血中升高：甲状腺功能减低症、高醛固酮血症、肾功能不全、恶性高热以及剧烈运动后等，尿中升高：卟啉病、血红蛋白尿症、血尿等血、尿中肌红蛋白均升高：见于急性心肌梗死、心绞痛、心源性休克、心肌病、肌疾病(进行性肌营养不良、多发性肌炎、重症肌无力)等。

市面上用于检测肌红蛋白主要是肌红蛋白检测试剂盒，其中CN201210290787.0一种肌红蛋白检测试剂盒及其制备方法，公开了以Tris缓冲剂为试剂的配方，CN201711130700.2一种肌红蛋白检测试剂盒及其使用方法，其主要以三羟甲基氨基甲烷为首的试剂，但相比于市面上所需，无法满足现有市场上的需求。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种测试简单、抗干扰能力强，同时具有检测结果准确性和稳定性以及灵敏度高的肌红蛋白检测试剂盒。

为解决上述问题，本发明采用如下技术方案：一种肌红蛋白检测试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，所述R1试剂包括二甲胂酸缓冲液、肌红蛋白抗体的纳米磁微粒、酶标记的肌红蛋白抗体、肌红蛋白校准品，牛血清白蛋白、蔗糖、柠檬酸三钠、氯化钾、乙二胺四乙酸、4,4'-二氨基-3,3'-二甲基联苯；所述R2试剂包括肌红蛋白抗体致敏聚苯乙烯胶乳颗粒和三羟甲基氨基甲烷缓冲液；

进一步的方案为：所述肌红蛋白抗体的纳米磁微粒为四氧化三铁纳米磁微粒。

进一步的方案为：所述纳米磁微粒的粒径为40-50nm。

本发明还提供一种肌红蛋白检测试剂盒的制备方法，包括以下步骤：包括

1)、首先取三氯化铁和二氯化铁溶液中加入表面活性剂季铵盐，搅拌15min，搅拌的同时加入到乙醇和氨水1:1混合液中，直至PH为9-10，继续搅拌并放置在周围温度为60℃-70℃水域中，震动器分散60min，沉淀24h，然后利用低温烘干器持续烘干，制得四氧化三铁纳米磁微粒备用；

2)、然后取二甲胂酸缓冲液100-200mmol/L、肌红蛋白抗体的纳米磁微粒10-20mg/L、酶标记的肌红蛋白抗体10-30mmol/L、肌红蛋白校准品20-100mmol/L，牛血清白蛋白150-300mg/L、蔗糖100-150mmol/L、柠檬酸三钠50-80mmol/L、氯化钾20-50mmol/L、乙二胺四乙酸10-30mmol/L、4,4'-二氨基-3,3'-二甲基联苯40-100mmol/L；肌红蛋白抗体致敏聚苯乙烯胶乳颗粒20-50mg/L和三羟甲基氨基甲烷缓冲液80-110mmol/L；

3)、把试剂把步骤2)的试剂进行混合搅拌，搅拌的同时放入步骤1)的四氧化三铁纳米磁微粒，然后再放入到超神波分散机内分散10h得到肌红蛋白检测试剂盒。