[发明专利]一种牛支原体病PCR快速诊断试剂盒在审
申请号: | 201810847415.0 | 申请日: | 2018-07-28 |
公开(公告)号: | CN109055582A | 公开(公告)日: | 2018-12-21 |
发明(设计)人: | 杨莉;余波;孙启跃;余国富;吴位珩;张涛;徐景娥;刘镜;黄波;冯明祥;姜玲玲;杨茂生 | 申请(专利权)人: | 贵州省畜牧兽医研究所 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12R1/35 |
代理公司: | 贵阳睿腾知识产权代理有限公司 52114 | 代理人: | 谷庆红 |
地址: | 550005 贵*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 支原体病 快速诊断试剂盒 漂洗剂 上引物 试剂盒 下引物 病毒核酸检测 牛支原体感染 病原核酸 抗体产生 临床样本 特异性强 阳性对照 阴性对照 预后评估 直接检测 重要意义 蛋白酶K 灵敏度 鼻拭子 裂解液 灵敏性 吸附柱 菌体 牛肺 引物 用时 诊断 防治 检测 | ||
1.一种牛支原体病PCR快速诊断试剂盒,其特征在于,该试剂盒包括:4000μL TBS液,800μL蛋白酶K,3200μL裂解液,24mL漂洗剂,200μLPCR酶,140μL DL2000Marker,20μL上引物,20μL下引物,40μL阳性对照,40μL阴性对照,1200μL TE缓冲液,20个吸附柱;引物浓度为20μM,漂洗剂用时现配,所述上引物的序列为:5’-ACGTGACTACTTCACCCTGAT-3’,所述下引物序列为:5’-TAGACCGACTATTTCACCTTC-3’。
2.根据权利要求1所述的牛支原体病PCR快速诊断试剂盒,其特征在于,所述TBS液,是10mmoL/L的Tris含0.9%NaCL,用1N HCl调pH至7.4。
3.根据权利要求1所述的牛支原体病PCR快速诊断试剂盒,其特征在于,所述蛋白酶K,用TE溶液配制成20mg/mL的溶液。
4.根据权利要求3所述的牛支原体病PCR快速诊断试剂盒,其特征在于,所述裂解液,是由10mM Tris-HCL、1mM EDTA、2.5M NaCL以及占裂解液总体积5%的SDS组成的混合溶液。
5.根据权利要求1所述的牛支原体病PCR快速诊断试剂盒,其特征在于,所述漂洗剂,是采用ddH2O配制的70%的乙醇。
6.根据权利要求1所述的牛支原体病PCR快速诊断试剂盒,其特征在于,所述TE缓冲液,是由10mM的Tris-HCL及1mM的EDTA组成的混合溶液,混合溶液的PH值为7.8。
7.根据权利要求1所述的牛支原体病PCR快速诊断试剂盒,其特征在于,所述PCR酶的组成包括:10mM的Tris-HCL(pH8.3)、50mM的KCL、1.5mM的MgCL2及0.05U Polymerase/μL。
8.根据权利要求1所述的牛支原体病PCR快速诊断试剂盒,其特征在于,所述阴性对照为超纯水,阳性对照为牛支原体DNA模板。
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