[发明专利]circ-WHSC1作为结直肠癌诊断标志物及其应用

说明书

本发明公开了环状RNA WHSC1在制备结直肠癌肿瘤发生以及肝转移疾病中临床诊断标志物的应用。本发明还公开了一种环状RNA WHSC1在作为结直肠癌药物治疗靶点中的应用。本发明进一步公开了一种治疗结直肠癌的制剂，包括特异性干扰环状RNA WHSC1的序列，该序列用于抑制所述环状RNA WHSC1的水平。本发明研究结果表明circ‑WHSC1在诊断结直肠癌发生以及转移中的重要临床意义，以及在制备用于治疗结直肠癌转移药物中的用途。

技术领域

本发明涉及肿瘤标志物医学技术领域，尤其涉及circ-WHSC1作为结直肠癌诊断标志物及其应用。

背景技术

随着人们生活饮食习惯和工作居住环境的改变，结直肠肿瘤(CRC)的发病率和死亡率在全球呈逐年递增趋势。CRC早期起病隐匿，较缺乏特异的临床表现，因此患者到医院就医时大部分都已发生了转移。肝脏是CRC远端转移最主要的靶器官，CRC患者发生肝转移是最主要的死亡原因，发生肝转移后5年生存率显著下降。在临床上若能早期发现、诊断CRC及其肝转移，能及时且合理地行根治性手术在内的综合治疗，能够极大的提高CRC患者的生存率、生存质量和延长生存时间。因此，深入进行CRC肝转移相关基因、分子及信号传导通路的研究具有十分重要的临床意义。

环状RNA(circRNA)是由pre-RNA经反向剪接后形成的，它们与普通的线性RNA不同，是一类由5’帽子端和3’尾端以共价键结合的环状闭合结构RNA，由于其具有很高的组织特异性和稳定性而逐渐被人们关注。目前研究最多的是外显子环状RNA，已经有报道指出它们参与调控包括心血管疾病、系统性红斑狼疮、神经系统性疾病和肿瘤等多种人类基本病理过程。越来越多的证据表明环状RNA参与调控多种肿瘤的发生，促进肿瘤细胞的增殖、调节细胞周期进程等，也有一些环状RNA参与调控肿瘤的转移。总体而言，进一步研究circRNA在结直肠肿瘤特别是结直肠肿瘤转移中的作用，对于结直肠癌的早期诊断以及肝转移的诊断和预后都具有重要的帮助。目前关于结直肠癌的诊断标志物大多为线性基因，申请号为2017108397037的中国专利报道了一种环状RNA作为结直肠癌诊断生物标志物的应用，但目前关于circ-WHSC1作为结直肠癌发生及其肝转移的环状RNA诊断标志物尚未见报道。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明的目的是提供circ-WHSC1作为结直肠癌诊断标志物及其应用，本发明公开了一种新的结直肠癌诊断标志物，能够明确清楚地表征结直肠肿瘤疾病的发生，该标志物在小鼠结直肠癌肝转移模型中的肝转移灶肿瘤中表达显著高于对照肿瘤；并且，在人临床结直肠癌组织中也呈现特异性高表达现象。

本发明的第一个目的是公开结直肠癌诊断生物标志物在制备结直肠癌诊断产品中的应用。结直肠癌诊断生物标志物，其为环状RNA WHSC1(circ-WHSC1)，核苷酸序列如SEQID No.1所示。

circ-WHSC1为线性WHSC1(又可称为NSD2，组蛋白甲基转移酶)第1-2号外显子剪切后所形成的环状RNA，circ-WHSC1在人基因组上的定位为：chr4:1902352-1906105+，相应的线性基因为WHSC1(NM_133334)，环化序列有789个碱基，包含2个外显子。

进一步地，结直肠癌诊断生物标志物用于诊断结直肠癌发生和/或结直肠癌肝转移。

进一步地，产品选自制剂、芯片或试剂盒。

进一步地，产品包括来扩增特异性识别环状RNA WHSC1的核酸序列的引物对。

进一步地，引物对包括上游引物和下游引物，上游引物的核苷酸序列如SEQ IDNo.2所示；下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。

本发明的第二个目的是公开一种治疗结直肠癌的制剂，包括特异性干扰环状RNAWHSC1的序列，该序列用于抑制环状RNA WHSC1的水平。