[发明专利]一种真菌漆酶突变体PIE5及其表达菌株和应用

权利要求书

1.一种真菌漆酶突变体PIE5，其特征在于：

是以定向进化手段对灰盖鬼伞漆酶Lcc9进行改造，构建突变文库，结合三轮筛选方法，获得的漆酶突变体，以提高漆酶的应用能力；

所述真菌漆酶突变体PIE5的氨基酸序列如SEQ ID No：1所示。

2.一种表达权利要求1所述的真菌漆酶突变体PIE5的菌株，其特征在于：

所述菌株的分类命名为Pichia pastoris pPIC9K-PIE5，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2018年7月19日，保藏编号为CCTCC NO：M 2018451。

3.一种权利要求1所述的真菌漆酶突变体PIE5的用途，其特征在于：

所述真菌漆酶突变体PIE5在染料脱色过程中作为脱色氧化剂的应用。

4.一种权利要求1所述的真菌漆酶突变体PIE5的应用，其特征在于：

所述真菌漆酶突变体PIE5在染料脱色过程中作为脱色氧化剂使用，具体包括如下步骤：

在反应体系pH值4.5-9.0、温度20-80℃、漆酶PIE5浓度40-200 U/L、介体浓度20-300 μM的条件下，对染料进行脱色处理，靛蓝的脱色率达到83%以上。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：

所述介体为丁香醛、丁香酸、丁香酸甲酯、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐或1-羟基苯并三唑。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：

所述染料为靛蓝染料。

7.根据权利要求5或6所述的应用，其特征在于：

当以丁香酸甲酯为介体时，将PIE5用于靛蓝脱色，靛蓝浓度200 μM、PIE5酶量160 U/L、介体MS浓度120 μM、体系pH为7.5下在60℃中反应50 min，靛蓝脱色率达到83.1±1.1%。

8.根据权利要求5或6所述的应用，其特征在于：

当以2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐为介体时，将PIE5用于靛蓝脱色，靛蓝浓度200 μM、PIE5酶量180 U/L、介体ABTS浓度200 μM、体系pH为7.0下在60℃中反应180 min，靛蓝脱色率达到90.9±0.3%。