[发明专利]敲减人TRAC/TRBC基因的siRNA、慢病毒载体、CAR-T细胞构建方法及应用

权利要求书

1.一种敲减人TRAC/TRBC基因的siRNA，其特征在于：所述敲减人TRAC基因的siRNA序列如SEQ ID NO.1所示；所述敲减人TRBC基因的siRNA序列如SEQ ID NO.6所示。

2.根据权利要求1所述的敲减人TRAC/TRBC基因的siRNA的慢病毒表达载体，其特征在于：所述敲减人TRAC基因的siRNA的慢病毒表达载体包含如SEQ ID NO.1所示的siRNA，所述敲减人TRBC基因的siRNA的慢病毒表达载体包含如SEQ ID NO.6所示的siRNA。

3.根据权利要求2所述的敲减人TRAC/TRBC基因的siRNA的慢病毒表达载体，其特征在于：所述表达载体为携带实体瘤特异性抗原靶点的慢病毒表达载体。

4.根据权利要求3所述的敲减人TRAC/TRBC基因的siRNA的慢病毒表达载体，其特征在于：所述实体瘤特异性抗原靶点具体为：表皮生长因子受体3型突变体EGFRvⅢ、EpCAM上皮细胞粘附分子、人表皮生长因子受体2HER2、白介素13受体α2IL13RA、癌胚抗原CEA、间皮素MSLN、成纤维细胞激活蛋白FAP、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3GPC3、卵泡刺激素受体FSHR、人前列腺特异性膜抗原PSMA、神经节苷脂GD2。

5.根据权利要求2所述的敲减人TRAC/TRBC基因的siRNA的慢病毒表达载体的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)携带实体瘤特异性抗原靶点的CAR基因的慢病毒表达载体的构建；

(2)将敲减人TRAC/TRBC基因的siRNA序列克隆进入携带实体瘤特异性抗原靶点的慢病毒表达载体中；

(3)敲减人TRAC/TRBC基因的慢病毒表达载体的包装。

6.根据权利要求5所述的根据敲减人TRAC/TRBC基因的siRNA的慢病毒表达载体的构建方法，其特征在于：所述实体瘤特异性抗原靶点具体为：表皮生长因子受体3型突变体EGFRvⅢ、EpCAM上皮细胞粘附分子、人表皮生长因子受体2HER2、白介素13受体α2IL13RA、癌胚抗原CEA、间皮素MSLN、成纤维细胞激活蛋白FAP、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3GPC3、卵泡刺激素受体FSHR、人前列腺特异性膜抗原PSMA、神经节苷脂GD2。

7.一种敲减人TRAC/TRBC基因的CAR-T细胞，其特征在于：所述CAR-T细胞是由如SEQ IDNO.1所示的siRNA修饰的T淋巴细胞，由如SEQ ID NO.6所示的siRNA修饰的T淋巴细胞。

8.根据权利要求7所述的敲减人TRAC/TRBC基因的CAR-T细胞，其特征在于：所述CAR-T细胞为携带实体瘤特异性抗原靶点的CAR-T细胞。

9.根据权利要求8所述的敲减人TRAC/TRBC基因的CAR-T细胞，其特征在于：所述实体瘤特异性抗原靶点具体为：表皮生长因子受体3型突变体EGFRvⅢ、EpCAM上皮细胞粘附分子、人表皮生长因子受体2HER2、白介素13受体α2IL13RA、癌胚抗原CEA、间皮素MSLN、成纤维细胞激活蛋白FAP、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3GPC3、卵泡刺激素受体FSHR、人前列腺特异性膜抗原PSMA、神经节苷脂GD2。

10.根据权利要求7所述的敲减人TRAC/TRBC基因的CAR-T细胞的应用，其特征在于：所述CAR-T细胞在制备杀伤肿瘤细胞药物中的应用。