[发明专利]一种急性差异性肝损伤诱导剂及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种急性差异性肝损伤诱导剂及其制备方法和应用，属于动物模型的造模领域。本发明所述急性差异性肝损伤诱导剂包括有效成分D‑氨基半乳糖和脂多糖；所述D‑氨基半乳糖在诱导剂中的浓度为50～120mg/mL；所述脂多糖在诱导剂中的浓度为0.1～10μg/mL；所述诱导剂的溶剂为生理盐水本发明所述应用包括以下步骤：向洁净小鼠腹腔施用急性差异性肝损伤诱导剂，12～48h后得到急性差异性肝损伤模型小鼠。本发明的应用成功率高，并且条件要求低、方法简便、造模周期短、重复性好，有明显肝损伤改变，足以供给肝脏实验的需求。

技术领域

本发明涉及动物模型的造模技术领域，尤其涉及一种急性差异性肝损伤诱导剂及其制备方法和应用。

背景技术

肝损伤是由多种病因所致的以短时间内大量肝细胞变性、坏死和炎细胞浸润等为特征的肝功能损伤的临床综合征，死亡率高。而肝细胞坏死是各型肝损伤共同的病理特点，包括:肝细胞坏死(necrosis)、程序性坏死(necroptosis)、凋立(apoptosis)及自噬(autophagyd。肝病病情进展，即肝细胞的存活状态与多种因素有关，在各种致病因素作用下，肝细胞通过启动多种保护机制维持细胞内环境稳定，促进细胞存活。故肝细胞自身的抗损伤能力与损伤因素共同决定肝病的结局。而绝大多数肝损伤患者优先选择的治疗方法为内科综合治疗，然而，由于发病机制尚不清楚，内科治疗效果局限，肝病患者的死亡率为50～80％。

实验动物急性肝损伤模型是研究各种肝脏疾病的发病机制的与治疗药物筛选中必不可缺的一个工具。近年来国内外制造实验性肝损伤动物模型方法主要集中在化学性肝损伤模型和免疫性肝损伤模型。化学性肝损仿模型主要是由四氯化碳(CCL4)、D-半乳糖(D-Gal)等；免疫性肝损伤模型多采用刀豆蛋白A(Con)、脂多糖(BCG+LPS)造模等。而肝脏损伤的复杂性以及肝功能损害的多样性使得同一模型不能从本质上全面性、客观反应肝损伤，且现有技术未提及急性差异性肝损伤的实验动物及化学、免疫二重因素损伤的模型，因此，动物差异性肝损伤模型的建立有待进一步完善与改进。

发明内容

本发明的目的在于提供一种急性差异性肝损伤诱导剂及其制备方法和应用，本发明的技术方案条件要求低、方法简便、造模周期短、建模成功率高、重复性好。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种急性差异性肝损伤诱导剂，包括有效成分和溶剂，所述有效成分包括D-氨基半乳糖和脂多糖；所述D-氨基半乳糖在诱导剂中的浓度为50～120mg/mL；所述脂多糖在诱导剂中的浓度为0.1～10μg/mL；所述诱导剂的溶剂为生理盐水。

优选的，所述D-氨基半乳糖在诱导剂中的浓度为70～90mg/mL；所述脂多糖在诱导剂中的浓度为0.5～2μg/mL。

优选的，所述D-氨基半乳糖在诱导剂中的浓度为80mg/mL；所述脂多糖在诱导剂中的浓度为1μg/mL。

本发明提供了一种上述方案中急性差异性肝损伤诱导剂的制备方法，包括以下步骤：

1)将D-氨基半乳糖和脂多糖溶于生理盐水中，得到溶解液；

2)将步骤1)中所述溶解液进行滤菌处理，得到急性差异性肝损伤诱导剂。

优选的，所述滤菌处理采用滤菌器进行，所述滤菌器的孔径为0.12～0.45μm。

优选的，所述滤菌器的孔径为0.22μm。

本发明提供了上述方案中的急性差异性肝损伤诱导剂在制备急性差异性肝损伤模型小鼠中的应用。

优选的，所述急性差异性肝损伤模型小鼠的造模方法，包括以下步骤：向洁净小鼠腹腔施用急性差异性肝损伤诱导剂，12～48h后得到急性差异性肝损伤模型小鼠。

优选的，所述洁净小鼠在施用前需禁饮禁食10～15h。