[发明专利]一种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）核酸恒温扩增方法

权利要求书

1.一种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA的扩增方法，其特征在于，所述扩增方法包括步骤：在反应体系中进行扩增，所述的反应体系中含有针对MRSA的SA 23s rRNA和mecA RNA的特异性引物对，所述引物对包括：

(i)SA 23s rRNA的T7引物：序列如SEQ ID NO:4所示；

(ii)SA 23s rRNA的nT7引物：序列如SEQ ID NO:5所示；

(iii)mecA RNA的T7引物：序列如SEQ ID NO:6所示；和

(iv)mecA RNA的nT7引物：序列如SEQ ID NO:7所示。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述反应体系还包括：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA SA 23s rRNA和mecA RNA的捕获探针。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述反应体系还包括：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA SA 23s rRNA的特异性检测探针和mecA RNA的特异性检测探针。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法还包括步骤：在扩增反应过程之中或之后，检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA SA 23s rRNA和mecA RNA的特异性检测探针发出的荧光信号。

5.一种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA的非诊断性检测方法，其特征在于，所述检测方法包括：

(a)提供一反应体系，所述反应体系含有待测样品，并且所述反应体系还含有耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA SA 23s rRNA的特异性检测探针和mecA RNA的特异性检测探针；

(b)用如权利要求1中所述的扩增方法对所述反应体系进行扩增；和

(c)在扩增反应过程之中或之后，检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA SA 23s rRNA的特异性检测探针和mecA RNA的特异性检测探针发出的荧光信号。

6.一种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：

(a)第一容器，以及位于所述容器内的用于扩增耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA的SA23s rRNA的特异性引物对，所述引物对包括：

(i)SA 23s rRNA的T7引物：序列如SEQ ID NO:4所示；

(ii)SA 23s rRNA的nT7引物：序列如SEQ ID NO:5所示；

(b)第二容器，以及位于所述容器内的用于扩增耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA的mecA RNA的特异性引物对，所述引物对包括：

(iii)mecA RNA的T7引物：序列如SEQ ID NO:6所示；和

(iv)mecA RNA的nT7引物：序列如SEQ ID NO:7所示；

以及(c)使用说明书。

7.如权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，还含有选自下组的一种或多种组分：

(d)捕获探针；

(e)检测探针；

(f)MRSA内标序列；和/或

(g)内标检测探针。

8.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，包括选自下组的一个或多个特征：

所述MRSA SA 23s rRNA检测探针包括如SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列，且mecA RNA检测探针包括如SEQ ID NO:9所示的核苷酸序列；和/或

所述的捕获探针包括如SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列；和/或

所述MRSA SA 23s rRNA内标序列包括如SEQ ID NO:12所示的核苷酸序列，而所述MRSASA 23s rRNA的内标检测探针包括如SEQ ID NO:14所示的核苷酸序列；和/或

所述mecA RNA内标序列包括如SEQ ID NO:13所示的核苷酸序列；而mecA RNA的内标检测探针包括如SEQ ID NO:15所示的核苷酸序列。