[发明专利]C7ORF70及其应用

说明书

本发明涉及C7ORF70及其应用，具体涉及结直肠癌诊断标志物C7ORF70及其在诊断结直肠癌中的应用。目前我国结直肠癌的5年生存率为50％‑60％之间，早期诊断是关键，临床多趋向于多种肿瘤标志物联合检测，联合检测可大幅提高各类肿瘤标。发明通过高通量测序分析和分子验证，寻找到与结直肠癌相关的分子标志物C7ORF70基因，对临床上结直肠癌基因检测具有重要的价值。

技术领域

本发明涉及肿瘤精准诊断领域，更具体地，本发明涉及结直肠癌诊断标志物C7ORF70及其在诊断结直肠癌中的应用。

背景技术

肿瘤的发生往往是一个长期的复杂过程，是在人体内部因素和外部环境因素的共同作用下形成的。而对于大多数恶性肿瘤来说，尚无很好的治愈方法。最好的办法就是找出致病原因，早预防，早发现和早治疗。恶性肿瘤一旦发生转移，将很难再治愈，研究证明转移占肿瘤患者死亡原因的90％以上。结直肠癌是最常见的恶性肿瘤之一，其发生是一个多基因、多步骤的过程，结直肠癌的早期诊疗对其预后有重要的临床意义，目前我国结直肠癌的5年生存率为50％-60％之间。早期诊断是关键，随着诊疗技术的发展以及对肿瘤发病机制研究的不断深入，肿瘤标志物逐渐应用于临床肿瘤的早期诊断并取得了良好的临床效果，但到目前为止，尚未发现针对某一类肿瘤具有很好的灵敏以及特异的肿瘤标志物，临床多趋向于多种肿瘤标志物联合检测，联合检测可大幅提高各类肿瘤标，发明人曾通过测序技术发现与直肠腺癌相关的一些基因，如MANBA(CN201511005822.X)、SLC26A9基因(CN201511004503.7)、TMIGD2基因(2015110045215)等，但还远远不够，2017年美国FDA批准有MSK申报的肿瘤多基因性能检测试剂MSK-IMPACT上市，该产品检测样本中468种基因突变及遗传突变，从基因检测的发展看，未来多基因联合检测是必然趋势，故而，需要发掘更多的结直肠癌相关的基因诊断标志物以提高基因检测的准确度和灵敏度。

本发明通过对结直肠癌组织及癌旁组织进行高通量测序及分析，寻找到与结直肠癌相关的分子标志物C7ORF70基因，进一步通过分子实验及细胞实验研究C7ORF70基因与结直肠癌的相关性及对结直肠癌的影响，结果表明C7ORF70能够作为结直肠癌的诊断标志物，用于疾病的早期分子诊断，并且C7ORF70与结直肠癌细胞的增殖和转移相关，有可能成为结直肠癌新的治疗靶点。本申请具有重要的临床应用价值。

发明内容

本发明的目的在于提供检测C7ORF70基因或蛋白的制剂在制备诊断结直肠癌试剂中的应用。

进一步，检测C7ORF70基因或蛋白的制剂包括检测C7ORF70基因表达的试剂。

更进一步，检测C7ORF70基因或蛋白的制剂包括能够定量C7ORF70基因mRNA的试剂，和/或能够定量C7ORF70蛋白的试剂。

优选的，定量为相对定量或绝对定量。

进一步，检测样本为癌组织或外周血，优选的，为外周血中循环肿瘤DNA(ctDNA)或循环肿瘤细胞(CTC)。

本发明的定量C7ORF70基因mRNA的试剂可基于使用核酸分子的已知方法来发挥其功能：如PCR、如Southern杂交、Northern杂交、点杂交、荧光原位杂交(FISH)、DNA微阵列、ASO法、高通量测序平台等。使用该试剂可以定性地、半定量地、或定量地实施分析。

进一步，所述PCR方法为已知方法，例如，ARMS(Amplification RefractoryMutation System，扩增不应突变系统)法、RT-PCR(逆转录酶-PCR)法、嵌套PCR法等等。扩增的核酸可以通过使用点印迹杂交法、表面等离子共振法(SPR法)、PCR-RFLP法、原位RT-PCR法、PCR-SSO(序列特异性寡核苷酸)法、PCR-SSP法、AMPFLP(可扩增片段长度多态性)法、MVR-PCR法、和PCR-SSCP(单链构象多态性)法来检测。