[发明专利]一种用于检测脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒，其特征在于，包含试剂R1和试剂R2，所述试剂R1包含以下浓度的组分：缓冲液50～300mmoL/L、无机盐5～50g/L、促聚剂1～20g/L、防腐剂0.05～2g/L，试剂R1中组分浓度为组分在试剂R1中最终浓度；所述试剂R2包含以下浓度的组分：缓冲液50～300mmoL/L、稳定剂10～160g/L、表面活性剂10～200g/L、封闭剂5～50g/L、包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗体的胶乳颗粒0.04～0.20g/L、防腐剂0.05～2g/L，试剂R2中组分浓度为组分在试剂R2中最终浓度；所述稳定剂至少为甘油、蔗糖、海藻糖、乙二胺四乙酸二钠中的一种。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述稳定剂为海藻糖和乙二胺四乙酸二钠的混合物。

3.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，在试剂R1中，所述缓冲液至少为MES-NaOH缓冲液、MOPS-NaOH缓冲液、HEPPS-NaOH缓冲液、Tris-HCl缓冲液、磷酸盐缓冲液、甘氨酸-NaOH缓冲液中的一种，所述无机盐至少为氯化钠、氯化钾、氯化铵、硫酸钠、硫酸钾、硫酸铵中的一种，所述促聚剂至少为聚乙二醇6000、聚乙二醇8000、聚乙二醇12000中的一种，所述防腐剂至少为叠氮钠、Proclin-300、硫柳汞中的一种；

在试剂R2中，所述缓冲液至少为MES-NaOH缓冲液、MOPS-NaOH缓冲液、HEPPS-NaOH缓冲液、Tris-HCl缓冲液、磷酸盐缓冲液、甘氨酸-NaOH缓冲液中的一种，所述表面活性剂至少为曲拉通X-100、吐温20、司盘40中的一种，所述封闭剂至少为牛血清白蛋白、酪蛋白、卵清蛋白中的一种，所述防腐剂至少为叠氮钠、Proclin-300、硫柳汞中的一种。

4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗体的胶乳颗粒是由聚苯乙烯胶乳微球进行制备，所述聚苯乙烯胶乳微球的粒径是相同的，聚苯乙烯胶乳微球的粒径为80～200nm。

5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述包被抗脂蛋白磷脂酶A2抗体的胶乳颗粒是通过以下方法进行制备：

S1)取聚苯乙烯胶乳微球溶液，用磷酸盐缓冲液稀释；

S2)加入N-羟基丁二酰亚胺和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐活化聚苯乙烯胶乳微球，搅拌均匀后孵育；

S3)再加入磷酸盐缓冲液，室温下搅拌；

S4)加入抗脂蛋白磷脂酶A2抗体后，进行孵育；抗脂蛋白磷脂酶A2抗体与聚苯乙烯胶乳微球的质量比为0.001～0.2；

S5)加入终止液终止反应，室温下搅拌后保存备用；所述终止液是含有质量体积浓度为20％BSA的磷酸盐缓冲液。

6.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，聚苯乙烯胶乳微球的粒径为120nm，聚苯乙烯胶乳微球溶液中聚苯乙烯胶乳微球的质量百分数为10％，所述抗脂蛋白磷脂酶A2抗体为鼠抗人脂蛋白磷脂酶A2单克隆抗体，抗脂蛋白磷脂酶A2抗体与聚苯乙烯胶乳微球的质量比为0.15。

7.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂R1由以下浓度的组分构成：磷酸盐缓冲液125mmoL/L、氯化钠35g/L、聚乙二醇12000 8g/L、叠氮钠0.5g/L；所述试剂R2由以下浓度的组分构成：磷酸盐缓冲液125mmoL/L、海藻糖100g/L、乙二胺四乙酸二钠5g/L、吐温20 120g/L、牛血清蛋白20g/L、包被抗人脂蛋白磷脂酶A2抗体的胶乳颗粒0.12g/L、Proclin-300 0.5g/L。

8.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂R1由以下浓度的组分构成：磷酸盐缓冲液125mmoL/L、氯化钠35g/L、聚乙二醇12000 8g/L、叠氮钠0.5g/L；所述试剂R2由以下浓度的组分构成：磷酸盐缓冲液125mmoL/L、海藻糖150g/L、吐温20 120g/L、牛血清蛋白20g/L、包被抗人脂蛋白磷脂酶A2抗体的胶乳颗粒0.12g/L、Proclin-300 0.5g/L。

9.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂R1由以下浓度的组分构成：磷酸盐缓冲液125mmoL/L、氯化钠35g/L、聚乙二醇12000 8g/L、叠氮钠0.5g/L；所述试剂R2由以下浓度的组分构成：磷酸盐缓冲液125mmoL/L、乙二胺四乙酸二钠10g/L、吐温20 120g/L、牛血清蛋白20g/L、包被抗人脂蛋白磷脂酶A2抗体的胶乳颗粒0.12g/L、Proclin-300 0.5g/L。