[发明专利]一种铜离子错配型通用隔断超快扩增比色传感器

说明书

本发明属于重金属检测领域，具体公开了一种铜离子错配型通用隔断超快扩增比色传感器。本发明通过巧妙地设计引物与模板(SEQ ID NO.1‑3所示)，使得在铜离子存在下可对模板进行超快扩增，并使扩增产物在适宜环境中形成G四链体。进一步利用G四链体的类过氧化物酶活性进行显色，解决了传统PCR产物难于可视化检测的难题，实现了对铜离子的快速、可视化检测。不仅如此，本发明所提供的传感器与方法对铜离子具有高特异、高灵敏的特点，检测结果更加客观、准确。

技术领域

本发明属于重金属检测领域，具体地说，涉及一种铜离子错配型通用隔断超快扩增比色传感器。

背景技术

铜是一种过渡元素，化学符号Cu，原子序数29，原子量是63.546，属第IB族。纯铜是柔软的金属，表面刚切开时为红橙色带金属光泽，单质呈紫红色。延展性好，导热性和导电性高，正常人体内铜的量为100-200毫克，在人体中铜离子主要以作为许多酶和蛋白的催化辅助因子或结构组成，广泛参与体内许多重要的新陈代谢过程，影响着人体血液的生成、结缔组织的形成，中枢神经系统，胆固醇和葡萄糖的代谢，心脏功能和免疫系统等，人体仅仅需要微量的铜就可以维持正常的生命活动。但是，铜缺乏或铜过量都会对健康产生不利的影响。铜缺乏一般伴随着其他营养元素的缺乏或者其生物拮抗物质的摄取过量，影响细胞内许多酶的正常功能，进而影响细胞的新陈代谢过程。铜过量通常是由于遗传性疾病或者由于环境重金属污染，误食了大量含铜的食物或吸入了含铜量高的气体所造成。铜(Cu)及其化合物在环境中所造成的污染主要由于铜锌矿的开采和冶炼、金属加工、机械制造、钢铁生产等产生，其中，冶炼排放的烟尘是大气铜污染的主要来源。

目前铜离子的检测方法有很多，主要包括原子吸收光谱法(AAS)、原子荧光光谱法(AFS)、电感耦合等离子体质谱法、电化学分析方法、可见分光光度法、流动注射化学发光法和微分电位溶出法等。这些方法具有灵敏度高、检测范围广、适合多种样品分析等优点，但是这些方法同样具有前处理复杂，需要大型仪器和专业人员操作、维护成本高、检测时间长、不适合用于现场快速检测等缺点。因此迫切需要一种对铜离子的操作简单、价格低廉、灵敏、快速、准确的可视化检测新方法。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种铜离子错配型通用隔断超快扩增比色传感器，以求实现对铜离子的快速、可视化检测。

为了实现本发明目的，本发明的技术方案如下：

第一方面，本发明提供一种铜离子错配型通用隔断超快扩增比色传感器，包括：(1)sPCR扩增体系，(2)包含ABTS显色液的检测体系，所述检测体系用于对待测样品经由所述sPCR扩增体系进行扩增后所得产物进行显色检测；

其中，所述sPCR扩增体系包括：模板、DNA聚合酶、正向引物、反向引物、dNTP、缓冲液；

所述模板为：

CCTCAGTATCAGTGCTATACGTCTTGTTGTTGCGATAGCGCCAGC；

所述正向引物为：

GTGGGTAGGGCGGGTTGG-隔断-CCAACCCGCCCTACCCAC

所述反向引物为：

GTGGGTAGGGCGGGTTGG-隔断-CCAACCCGCCCTACCCAC

所述正向引物和反向引物中的隔断为聚六乙二醇。

所述隔断与两端碱基通过磷酸二酯键方式连接。