[发明专利]一种铜离子错配型通用隔断超快扩增比色传感器

权利要求书

1.一种铜离子错配型通用隔断扩增比色传感器，其特征在于，包括：(1)sPCR扩增体系，(2)包含ABTS显色液的检测体系，所述检测体系用于对待测样品经由所述sPCR扩增体系进行扩增后所得产物进行显色检测；

其中，所述sPCR扩增体系包括：模板、正向引物和反向引物，以及用于将铜离子还原为亚铜离子的还原剂；

所述模板为：

TCATCGCACCGTCAAAGGAACCTCAGTATCAGTGCTATACGTC GATCAGTACCCCCCCCATGATAAGTCACGATTGTTGTTGCGATAG CGCCAGC；

所述正向引物为：

GTGGGTAGGGCGGGTTGG-隔断-CCAACCCGCCCTACCCACTCATCGCACCGTCAAAGGAACC；

所述反向引物为：

GTGGGTAGGGCGGGTTGG-隔断-CCAACCCGCCCTACCCACTCGTGACTTATCATCCCCCCCC；

所述检测体系中含有K⁺和氯高铁血红素。

2.根据权利要求1所述的传感器，其特征在于，所述正向引物和反向引物中的隔断为聚六乙二醇。

3.根据权利要求1或2所述的传感器，其特征在于，所述检测体系包括：酶活缓冲液和氯高铁血红素溶液。

4.权利要求1～3任一项所述的传感器在检测铜离子方面中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述检测为定性检测或定量检测。

6.一种利用权利要求1～3任一项所述的传感器对铜离子进行定性检测的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、利用所述sPCR扩增体系对待测样品和阴性对照样品进行聚合酶链式反应，得sPCR产物；

S2、利用所述检测体系对所述sPCR产物进行检测；

依据待测样品与阴性对照样品的颜色差异进行铜离子的定性判断；

所述阴性对照样品为不含有铜离子的去离子水。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述检测体系包括酶活缓冲液和氯高铁血红素稀释溶液，将酶活缓冲液、氯高铁血红素稀释溶液和sPCR产物按体积比为8:1:1混匀得到混合物，在35-40℃条件下反应20-40min，加入与上述混合物等量体积的ABTS显色液，混匀，35-40℃避光孵育，肉眼监测。

8.一种利用权利要求1～3任一项所述的传感器对铜离子进行定量检测的方法，其特征在于，包括如下步骤：

SI、制作标准曲线：

利用已知浓度的铜离子溶液，构建具有不同铜离子浓度的sPCR体系，扩增与检测步骤与权利要求6中的S1和S2相同；

以铜离子浓度为横坐标，以OD415值为纵坐标，绘制标准曲线；

SII、按照权利要求6所述的方法对待测样品进行检测，将测得的OD415值代入标准曲线，计算得到待测样品中铜离子的含量，实现对铜离子的定量检测。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述不同铜离子浓度的浓度区间为0.2uM～10uM。