[发明专利]具有抗肿瘤活性的吲哚生物碱及其制备方法和应用

权利要求书

1.具有抗肿瘤活性的吲哚生物碱，其特征在于，其结构式为：

2.根据权利要求1所述的具有抗肿瘤活性的吲哚生物碱的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将炭球菌属Daldinia光轮层炭壳Daldinia eschscholzii IFB-TL01的菌块接种于麦芽培养基中，于摇床上，培养2～3天，作为种子液；

(2)将步骤(1)所得的种子液接种到新的麦芽培养基中，继续培养2～3天，并且分别于24，48，72小时投喂吲哚-3-甲醇，至溶液中的终浓度为1.0mM，同等条件下继续培养8～10天；

(3)对步骤(2)所得培养液经纱布过滤，滤液用乙酸乙酯萃取，离心、浓缩得到黑色浸膏A；

(4)对步骤(3)所得浸膏A进行硅胶柱层析分段，用石油醚：丙酮进行梯度洗脱，得到7个洗脱部分A1-A7；

(5)取步骤(4)的A3段采用硅胶柱层析，采用石油醚：丙酮梯度洗脱，获得F1–F7 7个洗脱部位，取F3馏分经Sephadex LH-20柱层析，甲醇洗脱，甲醇洗脱液上高压制备液相，纯化获得化合物1；

(6)取步骤(4)的A4段经C-18柱层析梯度洗脱，获得馏分A4a–A4e，馏分A4c经ODS柱梯度洗脱，获得馏分A4c1–A4c6，A4c5经凝胶柱层析，半制备液相洗脱纯化，获得化合物2。

3.根据权利要求2所述的具有抗肿瘤活性的吲哚生物碱的制备方法，其特征在于，

步骤(4)中对所得浸膏A进行硅胶柱层析分段，依次用体积比为100:0,100:5,10:1,5:1,3:1,2:1,1:1的石油醚：丙酮进行梯度洗脱，得到7个洗脱部分A1-A7。

4.根据权利要求2所述的具有抗肿瘤活性的吲哚生物碱的制备方法，其特征在于，

步骤(5)中取步骤(4)得到的A3段继续用体积比为100:2至1:1的石油醚：丙酮梯度洗脱，获得F1–F7 7个洗脱部位，取其中的F3洗脱部位经Sephadex LH-20柱层析，甲醇洗脱，甲醇洗脱液经高压制备液相纯化，用体积比为70:30的MeOH和H₂O流动相洗脱，获得化合物1。

5.根据权利要求2所述的具有抗肿瘤活性的吲哚生物碱的制备方法，其特征在于，

步骤(6)中取步骤(4)得到的A4段(石油醚：丙酮＝5:1洗脱部位)经C-18柱层析，用体积比为30:70至100：0的甲醇/水梯度洗脱，获得馏分A4a–A4e，取其中馏分A4c经ODS柱，采用体积比40:60至100:0的甲醇/水梯度洗脱，获得馏分A4c1–A4c6，取其中的A4c5经凝胶柱层析，并用半制备液相纯化，并采用体积比为70:30的MeOH和H₂O洗脱纯化，获得化合物2。

6.权利要求1所述的吲哚生物碱在制备抗肿瘤药物中的应用。

7.权利要求1所述的吲哚生物碱在制备抗白血病中的应用。

8.一种药物制剂，其特征在于，它包括权利要求1所述的吲哚生物碱。

9.根据权利要求8所述的药物制剂，其特征在于，所述的制剂为丸剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂或注射剂。