[发明专利]一种培养大肠杆菌发酵生产氨基葡萄糖的方法

权利要求书

1.一种培养大肠杆菌发酵生产氨基葡萄糖的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将斜面保存的大肠杆菌接种入种子培养基中进行种子活化；所述种子培养基的溶质如下：蛋白胨10-20g/L，酵母膏15-25g/L，甘油2-4g/L，甘氨酸3-8g/L，生物素0.1-0.3g/L，调pH7.0-7.2；

(2)将活化后的种子液接种至发酵培养基中进行发酵培养，得到含氨基葡萄糖的发酵液；所述发酵培养基的溶质如下：葡萄糖25-35g/L，酵母膏15-25g/L，无氨基氮源8-12g/L，甘露糖醇6-10g/L，乳酸钠3-8g/L，甘氨酸硝酸盐3-8g/L，MgSO₄·7H₂O 0.4-0.8g/L，K₂HPO₄0.8-1.2g/L，(NH₄)₂SO₄2-4g/L，FeSO₄·7H₂O 0.4-0.6mg/L，调pH7.0-7.2。

2.根据权利要求1所述的培养大肠杆菌发酵生产氨基葡萄糖的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述种子培养基的溶质如下：蛋白胨15g/L，酵母膏20g/L，甘油3g/L，甘氨酸5g/L，生物素0.2g/L。

3.根据权利要求2所述的培养大肠杆菌发酵生产氨基葡萄糖的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述种子活化步骤的培养温度为35-37℃，控制摇床转速200-220rpm，培养时间为10-12h。

4.根据权利要求3所述的培养大肠杆菌发酵生产氨基葡萄糖的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述发酵培养基的溶质如下：葡萄糖30g/L，酵母膏20g/L，无氨基氮源10g/L，甘露糖醇8g/L，乳酸钠5g/L，甘氨酸硝酸盐5g/L，MgSO₄·7H₂O 0.6g/L，K₂HPO₄ 1.0g/L，(NH₄)₂SO₄ 3g/L，FeSO₄·7H₂O 0.5mg/L。

5.根据权利要求4所述的培养大肠杆菌发酵生产氨基葡萄糖的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述发酵培养步骤的培养温度为30-37℃，搅拌速度为250-300rpm，通气量为1.2-1.8vvm，培养时间为36-48h。

6.根据权利要求1-5任一项所述的培养大肠杆菌发酵生产氨基葡萄糖的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，还包括在发酵过程中加入补料培养基进行补料的步骤，所述补料培养基的溶质如下：葡萄糖500-600g/L，半乳聚糖60-100g/L。

7.根据权利要求6所述的培养大肠杆菌发酵生产氨基葡萄糖的方法，其特征在于，所述补料步骤为恒速补料，控制补料速率为5-6L/h。

8.根据权利要求7所述的培养大肠杆菌发酵生产氨基葡萄糖的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述大肠杆菌用LB斜面培养基进行保存。

9.根据权利要求8所述的培养大肠杆菌发酵生产氨基葡萄糖的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，还包括在种子活化步骤之前，将斜面保存的大肠杆菌划线至LB固体平板培养基中进行培养活化的步骤。

10.根据权利要求9所述的培养大肠杆菌发酵生产氨基葡萄糖的方法，其特征在于，所述LB斜面培养基和/或所述LB固体平板培养基中添加2-3g/L的半乳聚糖。