[发明专利]WDR1基因在制备非小细胞肺癌治疗和检测产品中的应用

权利要求书

1.人WDR1基因表达量检测试剂盒在制备非小细胞肺癌筛查检测产品和非小细胞肺癌治疗效果预后检测产品中的应用。

2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述检测试剂盒至少包括用于扩增核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示人WDR1基因片段的特异性引物对，所述特异性引物对的上游引物序列如SEQ ID NO:2所示，所述特异性引物对的下游引物序列如SEQ ID NO:3所示。

3.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述检测试剂盒还包括用于扩增内参肌动蛋白基因b-actin的特异性引物对，所述特异性引物对的上游引物序列如SEQ ID NO:4所示，所述特异性引物对的下游引物序列如SEQ ID NO:5所示。

4.根据权利要求1所述应用，其特征在于，具体包括如下步骤：

（1）采集受试者的NSCLC癌组织样品和正常组织样品，分别提取癌组织样品和正常组织样品的总RNA；然后将总RNA反转录为cDNA；

（2）利用引物分别进行实时荧光定量PCR检测NSCLC癌组织样品和正常组织样品中WDR1基因片段和内参b-actin基因的表达水平，对扩增产物定量和均一化后，进行数据分析；计算所述WDR1基因片段的Ct与内参肌动蛋白基因的Ct值之差ΔΔCt，根据ΔΔCt计算WDR1基因的相对表达量；

（3）采用群体测定值分布比较法，将步骤（2）中所述WDR1基因片段在NSCLC癌组织样品中的相对表达量与在正常组织样品中的相对表达量进行比较，若所述WDR1基因在NSCLC癌组织样品中的相对表达量高于在正常组织样品中的相对表达量，则预示肺非小细胞癌变的风险较高或非小细胞肺癌治疗预后效果差。

5.人WDR1基因功能表达抑制剂在制备非小细胞肺癌基因治疗药物中的应用，其特征在于，所述人WDR1基因功能表达抑制剂为shRNA，所述shRNA序列包括两个靶向人WDR1基因编码DNA的反向重复序列，中间由一茎环序列分隔；其中，两个反向重复序列分别为人WDR1基因的shRNA靶点序列及其互补序列，所述人WDR1基因的shRNA靶点序列及其互补序列如SEQID NO:6和SEQ ID NO:7所示。