[发明专利]鹿胎多重PCR-RFLP-CE DNA指纹图谱及鉴定方法在审
| 申请号： | 201810496611.8 | 申请日： | 2018-05-22 |
| 公开（公告）号： | CN108676895A | 公开（公告）日： | 2018-10-19 |
| 发明（设计）人： | 周亭亭;苑广信;艾金霞;王雪松;王艳双 | 申请（专利权）人： | 北华大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/683;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 132013 吉林*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 鹿胎 中药材 限制性片段长度多态性分析 多重聚合酶链式反应 毛细管电泳技术 自动化分析 高稳定性 真伪鉴定 多重PCR 灵敏度 分辨率 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种中药材鹿胎DNA鉴定方法，其特征在于：所述方法采用多重PCR（多重聚合酶链式反应）、RFLP（限制性片段长度多态性分析）结合CE（毛细管电泳技术）建立鹿胎DNA指纹图谱及鉴定方法，可以快速准确的鉴别鹿胎样品真伪。
2.一种如权利要求1中所述中药材鹿胎DNA鉴定方法，其特征在于：
包括以下步骤：
1)DNA提取：取鹿胎样品，按盐析法提取其DNA；
2)多重PCR扩增：A上游引物1ul；A下游引物1ul；B上游引物1ul；B下游引物1ul；Taq聚合酶12.5ul；所提取DNA样品2ul；ddH2O 6.5ul，总体积25ul；
3)PCR产物纯化：吸取稀释后的PCR产物1.0 μl注入进样板，加灭菌双蒸水9.0 μl使总体积至10 μl，离心；再加入30 μl乙醇乙酸钠，8℃、3600r/min离心30 min；弃上清液，加入50 μl 70％乙醇漂洗1次，置于室温晾干；
4)PCR产物鉴定：扩增产物进行RFLP（限制性片段长度多态性分析）鉴定；
5）将RFLP产物进行CE（毛细管电泳）分析，记录电泳图谱；并构建鹿胎多重PCR-RFLP-CEDNA指纹图谱。
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