[发明专利]肺癌ALK基因重排快速检测荧光探针及制备方法在审
申请号: | 201810473715.7 | 申请日: | 2018-05-17 |
公开(公告)号: | CN108690878A | 公开(公告)日: | 2018-10-23 |
发明(设计)人: | 周勇;黄崴 | 申请(专利权)人: | 重庆高圣生物医药有限责任公司 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12Q1/6841;C12N15/11 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 400039 重庆市*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基因重排 快速检测 荧光探针 非小细胞肺癌 肺癌相关基因 快速检测技术 生物技术领域 交叉反应 快速荧光 原位杂交 重复序列 假阳性 探针 异性 制备 肺癌 杂交 诊断 | ||
1.一种肺癌ALK基因重排快速检测荧光探针,其特征在于,所述荧光探针是双色分离探针,两组荧光探针分别位于ALK基因的3’的两端。
2.如权利要求1所诉一种肺癌ALK基因重排快速检测荧光探针,其特征在于,所述荧光为红,绿两种探针,ALK基因位于2号染色体短臂2区3带的位置,其基因长度为728.838Kb,采用ALK基因3’端上游300Kb基因红色荧光标记,ALK基因3’端下游420Kb采用绿色荧光标记。
3.如权利要求1所述的肺癌ALK基因重排快速检测荧光探针的制备方法,其特征在于,
a)探针DNA的获取:含有ALK基因和EML4基因的BAC菌种经过划线接种,初始培养及过夜培养之后,提取BAC菌种质粒;
b)探针标记:采用以BAC为模板设计的引物,扩增ALK基因的片段
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18R .ctgtccaaccatgcttccct
19F. gcctctcctcgatgtgtctg
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c)链接反应:采用引物扩增通过标记的荧光原料嵌入式标记所有探针;
d)纯化DNA:通过凝胶柱或者乙醇沉淀的方式纯化和沉淀DNA。
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