[发明专利]一种牡丹籽粕中提取抗氧化肽的方法

说明书

本发明涉及一种牡丹籽中提取抗氧化肽的方法，属于农产品加工技术领域。该方法具体通过以下步骤实现：将牡丹籽粕冷冻后微波解冻，脱脂后干燥研磨成粉；将牡丹籽粕粉加入溶剂，乳糖醇及柠檬酸，静置后调pH值到11.0，1超声，离心取上清液，然后调节pH至3.80，离心，沉淀冻干，得冻干粉；称取冻干粉溶于去离子水，加入蜂蜡，预热，得混合液；将混合液调节pH为8.0，加入蛋白酶，酶解，灭酶活，收集上清液冷冻干燥即可。本发明利用牡丹籽粕为原料，综合考虑水解度和抗氧化性，获得了利用牡丹籽粕蛋白制备具有较强抗氧化活性多肽的最佳工艺，为牡丹籽粕的精深加工开发利用提供理论依据，且制备工艺简单，市场前景好。

技术领域

本发明涉及一种牡丹籽中提取抗氧化肽的方法，属于农产品加工技术领域。

背景技术

生物活性肽是介于蛋白质和氨基酸之间的肽类，其具有期望的生物活性，包括抗氧化，降血压，抗血栓形成，降血脂，抗微生物和抗炎作用。抗氧化肽由5~16个氨基酸残基组成，与其它生物分子相比，具有极强的生物活性和多样性，抗氧化性更为显著，安全性高。目前用于制备抗氧化肽的方法主要包括人工合成法、酶解法和生物发酵法，在制备生物活性肽的过程中，酶解技术是最快、最安全、最易控制的技术，它能同时提高蛋白质的功能性和生物学特性，也能增加副产品的商业价值。

牡丹属于芍药科芍药属，为多年生落叶小灌木，是一种经济价值和营养价值都很高的植物。牡丹籽可用于榨油，其籽油富含α-亚麻酸，具有降血压、降血脂等多种保健功能；牡丹根皮中含有丰富的丹皮，可用于生产中药；牡丹的花、蕾、芽可用于制作保健茶；牡丹籽饼粕富含膳食纤维，可用于发酵生产酵素，调节胃肠道健康。自国家卫生部批准牡丹籽油为新资源食品以来，油用牡丹种植面积急剧扩大，牡丹籽产量逐年提高，油脂提取后产生的牡丹籽饼粕也随之增加。工业上这些饼粕主要作为饲料原料或食用菌培养基基料，综合开发利用水平低；科研方面主要集中在牡丹籽饼粕蛋白的提取工艺优化及性质评价上。牡丹籽饼粕蛋白含量约25%，但目前利用制备的牡丹籽粕蛋白研发活性肽的研究还鲜见报道，个别有关牡丹籽蛋白酶解的工艺优化多以提高水解度为目标。由于水解度与抗氧化能力之间并不是单纯的线性关系，根据蛋白水解度制备的抗氧化肽的活性还不是很高。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种牡丹籽粕中提取抗氧化肽的方法。

本发明为了实现上述目的所采用的技术方案为：

本发明提供了一种从牡丹籽粕中提取抗氧化肽的方法，包括以下步骤：

（1）将牡丹籽粕冷冻后微波解冻，脱脂后干燥研磨成粉，得牡丹籽粕粉备用；

（2）将牡丹籽粕粉按照体积比1：25质量比加入溶剂，浆料中加入乳糖醇及柠檬酸，混合均匀后，静置15-20min，然后加入NaOH溶液调pH值到11.0，180 W超声2.5 h，离心取上清液，然后用HCl溶液调节pH至3.80，离心去上清留沉淀，沉淀置于真空冷冻干燥机中冻干，得冻干粉-20℃储存备用；

（3）称取冻干粉溶于去离子水，加入蜂蜡，置于80℃水浴中预热20 min，得混合液；

（4）将混合液调节pH为8.0，加入碱性蛋白酶和风味蛋白酶，酶解，然后将酶解液置于沸水中加热10min灭酶活，冰浴迅速冷却，离心，收集上清液冷冻干燥即可。

进一步的，步骤（1）中，所述牡丹籽粕在-20℃冷冻，然后微波解冻。

进一步的，所述溶剂为去离子水和聚乙二醇的混合溶液；所述去离子水和聚乙二醇的体积比为1：0.1-0.2。

进一步的，所述乳糖醇的加入量占浆料总重的1-2%；所述柠檬酸的加入量占浆料总重的0.8-1%。

本发明所使用的NaOH溶液及HCl溶液的浓度均为1mol/L。

进一步的，步骤（3）中，所述每0.7g冻干粉中加入100mL去离子水。