[发明专利]一种利用液体菌种快速扩繁羊肚菌栽培种的方法

说明书

本发明涉及羊肚菌菌种制备的技术领域，特别是涉及一种利用液体菌种快速扩繁羊肚菌栽培种的方法，包括以下步骤：1)、准备羊肚菌液体原种的培养基，羊肚菌液体原种的培养基组成如下：马铃薯200g、葡萄糖20g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁1g、酵母粉1g、蛋白胨2g、维生素B₁0.5g；2)、将马铃薯挖去芽眼，去皮，切成1cm见方的小块，小火煮20分钟，然后使用8层纱布过滤，取滤液；3)、按比例称取葡萄糖、磷酸氢二钾、硫酸镁、酵母粉、蛋白胨、维生素，加入马铃薯滤液中，用蒸馏水定容至1000ml，调节pH至7.0；4)、将步骤3)中配制好液体培养基取100ml液体培养基装入250ml摇瓶，封口膜封口，121℃，灭菌20min。5)、灭菌后的培养基冷却到室温。

技术领域

本发明涉及羊肚菌菌种制备的技术领域，特别是涉及一种利用液体菌种快速扩繁羊肚菌栽培种的方法。

背景技术

众所周知，随着科学技术的进步，目前羊肚菌的一些种已实现人工栽培，成为一个新兴的、极具潜力的菇种。近年来，随着羊肚菌人工栽培技术研究的逐渐深入，2012至2016年度全国羊肚菌种植面积持续增加，据统计2016年栽培面积达到23400亩，规模化种植区域逐渐由主产区四川扩展至湖北、河南、河北等省推进，成为当前食用菌行业最热门的栽培品种。

羊肚菌实现规模化种植，播种期相对集中，菌种生产时菌龄短，要求制种者在短时间内集中完成菌种制备。食用菌菌种分为液体菌种和固体菌种。对于羊肚菌来说，由于需要将菌种播种于土内，因此液体菌种并不适合直接用于播种。但是，相较于固体菌种，液体菌种具有生产成本低、生长时间短、发菌速度快等优点，适合于羊肚菌菌种快速扩繁。因此，将液体菌种与固体菌种结合进行羊肚菌菌种的快速扩繁对于羊肚菌产业的发展意义重大。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种提高制备效率的利用液体菌种快速扩繁羊肚菌栽培种的方法。

本发明的一种利用液体菌种快速扩繁羊肚菌栽培种的方法，包括以下步骤：

1)、准备羊肚菌液体原种的培养基，羊肚菌液体原种的培养基组成如下：马铃薯200g、葡萄糖20g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁1g、酵母粉1g、蛋白胨2g、维生素B₁ 0.5g；

2)、将马铃薯挖去芽眼，去皮，切成1cm见方的小块，小火煮20分钟，然后使用8层纱布过滤，取滤液；

3)、按比例称取葡萄糖、磷酸氢二钾、硫酸镁、酵母粉、蛋白胨、维生素，加入马铃薯滤液中，用蒸馏水定容至1000ml，调节pH至7.0；

4)、将步骤3)中配制好液体培养基取100ml液体培养基装入250ml摇瓶，封口膜封口，121℃，灭菌20min；

5)、待冷却后，在超净台内接入1cm见方的羊肚菌母种块，25℃培养，第1天静置培养，第二天调节转速120rpm，第3天后150rpm，培养5天后，可见羊肚菌菌丝呈雪花状，颜色呈金黄色；

6)、将步骤5)配制好的液体培养基装入250ml发酵罐中，121℃，灭菌30min后通入净化的无菌空气冷却；

7)、冷却后，将三角瓶液体菌种接种到发酵罐中，25℃培养5天，即得到羊肚菌液体菌种；

8)、准备羊肚菌栽培种，其包括57％木屑，30％小麦粒，8％土，3％草木灰，1％石膏，1％石灰；

9)、拌料，第一天预湿木屑，加少量石灰浸泡小麦，第二天将小麦粒煮至无白芯但不破皮，然后将称好的其他的培养料拌匀后加水搅拌，含水量一般在60％左右；

10)、装袋，采用专用机械或人工装袋，装料用的菌袋规格：170mm×330mm；

11)、灭菌，将菌袋放入专用的灭菌设备进行灭菌，一般常压下，气温达到100℃维持10小时，或高压121℃时维持2.5小时；