[发明专利]一种检测小鼠脑脊髓炎病毒RT-RPA扩增方法及其试剂盒

权利要求书

1.一种检测小鼠脑脊髓炎病毒的RT-RPA的检测试剂盒，其特征在于，包含引物组和探针；其中，

所述引物组的核苷酸序列如下所示：

TMEV-F：5’-TTCCTATGGAGATGACCTATTAATTGGAAC-3’；

TMEV-R：5’-TCAGAGGAAAGGTGGTGGTCTTGTTGGCAG-3’；

所述探针的核苷酸序列如下所示：

TAATCTTATAACCGAAGGGGGCTAATCTTT-THF-TTTAACAAGATTAAA。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，该试剂盒中还含有目的基因的重组酶聚合酶扩增试剂。

3.一种非疾病诊断目的的小鼠脑脊髓炎病毒的RT-RPA的检测方法，其特征在于，包含以下步骤：

1)提取样品RNA；

2)以提取的RNA作为模板，使用权利要求1所述的引物组TMEV-F、TMEV-R，以及所述探针进行RT-RPA扩增反应获得扩增产物；

3)对扩增产物进行曲线分析，确定样品中是否含有小鼠脑脊髓炎病毒。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，向RPA扩增试剂说明书推荐反应的50ul扩增体系中加入10μM的引物各2μL，10μM的探针0.6μL、2μL RNA。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤2)的扩增反应条件为：39℃恒温反应20min。