[发明专利]一种软组织修复用脱细胞罗非鱼皮仿生基质及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种软组织修复用脱细胞罗非鱼皮仿生基质及其制备方法和应用，属于医用材料领域。所述脱细胞罗非鱼皮仿生基质是以罗非鱼皮为原料经特殊处理而成；所述软组织修复用脱细胞罗非鱼皮仿生基质的制备方法包括原料前处理、粗整理、脱细胞、再整理、保存液预处理、成型等工艺步骤。本发明方法制得的软组织修复用脱细胞罗非鱼皮仿生基质天然网络结构完整、柔韧性好，是低免疫原性的仿生细胞外基质支架材料；具有良好的生物功能和力学性能，可用于多种软组织修复如烧烫伤创面、溃疡创面、疝气修补、硬脑膜修补、尿道/膀胱/盆底重建、牙周组织修复、粘膜组织修复等。

技术领域

本发明属于生物医用材料领域，具体涉及一种软组织修复用脱细胞罗非鱼皮仿生基质及其制备方法和应用。

背景技术

软组织损伤修复是常见的创伤外科病症，病因致伤因素多样，是许多临床科室急需解决的棘手问题。传统治疗方法预后质量不高且易发创面感染等并发症，严重时甚至致残或致死。此外，有些需用组织工程手段修复的软组织损伤受限于材料的缺乏或费用昂贵等，难以作为常见临床路径普遍推广。软组织损伤的修复问题已成为研究热点之一。

常见软组织修复材料包括高分子材料、生物材料以及合成材料等多种类型，但迄今为止，脱细胞基质(Acellulardermalmatrix，ADM)仍是最为接近机体组织生理性结构和功能的生物型创伤修复产品，由于具有天然的仿生结构，其组织相容性和组织诱导性极为突出。脱细胞猪皮、牛皮已被开发成医疗制品成功应用于临床难愈性创面的修复，其促进组织再生和创面愈合的功能也已得到临床证实，但由于存在疯牛病(牛)、蓝耳病(猪)等人畜共患病毒传播的风险，已被列为国家药监总局列入最高风险等级的产品予以严密监控。此外，由于宗教信仰等问题，猪、牛源性的医疗产品在以色列以及其他伊斯兰国家、地区不能进入临床应用，这些区域由于软组织损伤的致残率和死亡率极高。

鱼皮在水产品加工中作为废弃资源处理，每年废弃量达数万吨之多。鱼皮的结构与哺乳动物皮肤类似，但鱼的病毒传播风险远低于陆地动物，可有效规避宗教伦理壁垒，因此，脱细胞鱼皮基质有望替代陆地动物脱细胞基质成为软组织修复的理想仿生基质材料。罗非鱼是我国四大淡水鱼之一，每年产量上百万吨，而鱼皮约占5％。罗非鱼皮中胶原蛋白含量约为20.65％，是制备鱼胶原蛋白的主要原料，业已证实，罗非鱼皮源性的鱼胶原蛋白可有效促进创面愈合及组织再生，已作为新型胶原蛋白用于多种组织工程技术的研究。2017年5月，巴西塞阿拉联邦大学的研究人员首次将罗非鱼皮用于Ⅱ、Ⅲ度烧伤创面的人体治疗，效果显著。他们将罗非鱼皮清洗、去腥、灭菌后，直接覆盖于烧伤创面并以纱布固定，10天后解开纱布并去除罗非鱼皮，入组的56例患者均表现出良好的皮肤修复效果，且治疗过程中疼痛度降低，治疗费用更是显著降低了75％，极为适用于经济不发达地区。研究人员认为，罗非鱼皮中Ⅰ型胶原蛋白含量很高，可长时间保持创面湿润，不仅可减轻疼痛、促进愈合，而且大幅度减少换药次数，大大降低了治疗费用。我国学者也有过用罗非鱼皮胶原蛋白治疗大鼠皮肤损伤的报道，证实其对于软组织损伤修复具有良好的促进和诱导作用，但没有罗非鱼皮直接用于人体软组织修复的研究或报道。

在巴西报道的人体临床应用中，罗非鱼皮优异的软组织修复功能及临床有效性业已得到证实，且该方法成本低廉、无宗教壁垒，具备在全球范围内普遍推广的基础。然而，该报道中所用的罗非鱼皮仅进行了简单的去鳞、去冗余、去腥及灭菌处理，未去除免疫原性较强的细胞，仍存在致敏或免疫排斥的可能，存在临床使用安全性的隐患；所用的罗非鱼皮仍保留了大量色素等组份，使得每片鱼皮差异性极大，难以进行质量控制或风险监控，不能作为规模化生产的医疗产品进行市场销售。我们团队已在罗非鱼皮明胶、胶原蛋白、多肽等的制备及产业化领域具有丰富经验，对脱细胞罗非鱼皮仿生基质的制备也有突破性进展。对罗非鱼皮进行脱细胞、脱色素处理后，其仿生三维结构得以良好保持而免疫原性物质基本去除，大大提高了临床使用的安全性，此外，经本发明处理的脱细胞罗非鱼皮仿生基质材料工艺稳定性好、质量风险可控、力学性能和生物功能保持良好，能满足CFDA对于组织工程产品的安全性和有效性要求，有望作为医疗产品进行成果转化并大规模化应用于临床