[发明专利]一种寨卡病毒一步法荧光rt-PCR检测方法及试剂盒在审
| 申请号： | 201810293046.5 | 申请日： | 2018-03-30 |
| 公开（公告）号： | CN108531647A | 公开（公告）日： | 2018-09-14 |
| 发明（设计）人： | 江振友;颜宇琦 | 申请（专利权）人： | 暨南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 陈燕娴 |
| 地址： | 510632 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 寨卡病毒 试剂盒 一步法 特异性引物 检测 荧光 探针 荧光定量PCR反应 核苷酸序列 血清学检测 遗传标志物 荧光rt-PCR 交叉反应 反应管 广谱性 黄病毒 灵敏 应用 污染 | ||
1.一种用于检测寨卡病毒的遗传标记物，其特征在于：
其核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
2.权利要求1所述的用于检测寨卡病毒的遗传标记物在制备检测寨卡病毒试剂盒中的应用。
3.一种用于检测寨卡病毒的特异性引物对，其特征在于：
上游引物序列为：5’-GGTTCTCATCAATGGTTTTGCT-3’；
下游引物序列为：5’-TGGAACAACCATCGCTCGTA-3’。
4.一种与权利要求3所述的特异性引物对配合使用的荧光探针，其特征在于：
其序列为5’-TGGCCTGGTTGGCA-3’，在所述的序列的5’端标记荧光报告基团，在其3’端标记荧光淬灭基团。
5.权利要求3所述的用于检测寨卡病毒的特异性引物对和/或权利要求4所述的荧光探针在制备检测寨卡病毒试剂盒中的应用。
6.一种检测寨卡病毒试剂盒，其特征在于：
含有权利要求3所述的用于检测寨卡病毒的特异性引物对。
7.根据权利要求6所述的检测寨卡病毒试剂盒，其特征在于：
还包含权利要求4所述的荧光探针。
8.一种寨卡病毒一步法荧光rt-PCR检测方法，其特征在于：
利用如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示的特异性引物对和SEQ ID NO.3所示的荧光探针进行实时荧光定量PCR，检测待测样本中的寨卡病毒。
9.根据权利要求8所述的寨卡病毒一步法荧光rt-PCR检测方法，其特征在于：
在所述的荧光rt-PCR的反应体系中，所述的引物的终浓度为0.1～1μM；所述的荧光探针的终浓度为0.1～0.5μM。
10.根据权利要求8所述的寨卡病毒一步法荧光rt-PCR检测方法，其特征在于：
所述的实时荧光定量PCR反应条件为：42℃反转录5min，95℃，预变性10s；95℃变性5s，60℃荧光检测34s，40个循环。
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