[发明专利]一种NTN-4化学发光酶免疫定量测定试剂盒及应用

说明书

本发明公开了一种NTN‑4化学发光酶免疫定量测定试剂盒及应用，本发明经20％蔗糖保护剂保护的预包被抗NTN‑4单克隆抗抗体的化学发光板稳定性达1年。本发明试剂盒的拟合标准曲线相关系数可达r＝0.9987，大于0.9900；准确性结果相对偏差为3.06％，小于10％；检测限为0.88ng/mL；线性考察，浓度值拟合直线的相关系数r＝0.9996，相关系数大于0.9900；重复性结果的变异系数CV均小于10％；在应用于临床样本的检测中能够明显的区分正常人和病人。该试剂盒展示了良好的准确性、线性、重复性、最低检测限，具有良好的测定血清中的NTN‑4蛋白的浓度的能力，能够作为检测胃癌的辅助诊断。

技术领域

本发明属于医学检测技术领域，具体涉及一种NTN-4化学发光酶免疫定量测定试剂盒及应用。

背景技术

胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一，据世界卫生组织/国际癌症研究中心(IARC)公布的统计数据显示，2012年全球胃癌新病例95.2万，中国胃癌新发病例40.5万，占全球胃癌发病的42.6％；2012年全球范围内胃癌死亡病例72.3万，死亡率为10.2/10万，我国胃癌死亡病例32.5万，死亡率为21.9/10万。全国死因回顾抽样调查报告数据显示，2004～2005年全国胃癌从1973～1975年和1990～1992年均稳居恶性肿瘤首位后移至肺癌和肝癌之后的第3位。可见，我国属于胃癌发病率和死亡率均较高的国家。

神经导向因子4(netrin-4，NTN-4)是一种分泌蛋白，可与不同受体结合，参与神经细胞生长、迁移等生理功能。NTN-4具有诱导细胞和轴突迁移的功能，能促进神经突生长，是神经系统发展中细胞和轴突迁移必需的趋向性化学信号。体内研究表明，NTN-4具有调节血管生成和促淋巴管形成作用，从而影响肿瘤的发生、发展和转移；体外研究发现，NTN-4对肿瘤细胞的增殖、迁移等有不同的作用，可能与NTN-4和不同受体结合有关。肿瘤细胞生长与NTN-4的浓度具有相关性，NTN-4在肿瘤细胞中表达与甲基化有关。因此，NTN-4及其受体在肿瘤的生长，转移等方面发挥作用。

现有NTN-4化学发光酶免疫定量测试试剂盒检测的准确度、灵敏度仍然不足，鉴于此，建立一种有效、快速、简单、灵敏的检测NTN-4的方法，应用于肿瘤的辅助诊断或疗效监测与预后具有重要意义。

发明内容

本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。

鉴于上述的技术缺陷，提出了本发明。

因此，作为本发明其中一个方面，本发明克服现有技术中存在的不足，提供一种NTN-4化学发光酶免疫定量测定试剂盒。

为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：一种NTN-4化学发光酶免疫定量测定试剂盒，其包括，NTN-4标准品溶液、NTN-4质控品溶液、样本稀释液、生物素标记抗NTN-4单克隆抗体、辣根过氧化物酶标记的链酶亲和素、抗体稀释液、化学发光溶液、浓缩洗涤液、化学发光板，所述化学发光板上包被有抗NTN-4单克隆抗体，所述抗NTN-4单克隆抗体包被浓度为2～3μg/mL。

作为本发明所述NTN-4化学发光酶免疫定量测定试剂盒的一种优选方案，其中：所述化学发光板为不透明聚苯乙烯化学发光板，所述化学发光板上包被有抗NTN-4单克隆抗体，所述抗NTN-4单克隆抗体包被浓度为2.5μg/mL。

作为本发明所述NTN-4化学发光酶免疫定量测定试剂盒的一种优选方案，其中：所述试剂盒的检测样本为人血清样本。

作为本发明所述NTN-4化学发光酶免疫定量测定试剂盒的一种优选方案，其中：所述NTN-4的标准品溶液浓度分别为：0、1.25、2.5、5、10、20ng/mL。