[发明专利]一种区分水牛和奶牛奶的miRNA标记物及其应用

说明书

本发明公开一种区分水牛和奶牛奶的miRNA标记物及其应用，涉及生物技术领域。所述的miRNA标记物为miR‑2285t，其序列如SEQ ID NO：1所示。本发明的结果显示miR‑2285t基因在奶牛奶外泌体中极显著高表达。所述miR‑2285t可在制备区分水牛和奶牛奶检测试剂中应用，为农业生产中在分子水平上区分水牛和奶牛奶提供了新的鉴定方法。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种区分水牛和奶牛奶的miRNA标记物及其应用。

背景技术

miRNA又称microRNA，是一类由大约22个核苷酸组成的单链非编码RNA，主要利用信使RNA的直接剪切或间接抑制翻译在转录后水平调控靶基因的表达。miRNA在个体发育的不同时期如细胞分化、增殖、凋亡等及不同组织中有不同的表达模式，表明其在发育和分化中起着重要的调控作用。通过对组织miRNA表达谱的研究已经发现，miRNA具有很强的细胞、组织或疾病特异性，这些特异表达的miNRA既是其功能研究的基础，又是不同细胞、组织、器官或疾病模型的标记物。

乳汁是所有哺乳动物新生儿的重要营养来源，包含了许多生物学上的活性物质，如：细胞因子类，生长因子类及激素类物质，这些都可调节新生儿的发育。水牛乳汁的脂肪、蛋白质、乳糖的含量是普通奶牛奶的数倍，矿物质和维生素含量也是奶牛和人乳的数十倍。其香醇浓厚，胆固醇低，维生素、微量元素丰富，尤其是酪蛋白含量高，能进行高质量乳制品的深加工。作为一类高级营养食品，水牛奶制品日渐成人们消费的“新宠”。外泌体为多种细胞、组织或有机体在正常或病理状态下分泌的一类直径为30～100nm之间的膜上小囊泡，表现为球形结构，含有亲水性的水溶性和有限的脂质双分子层成分。研究表明除上皮细胞、B细胞、T细胞等多种细胞可分泌外胞体外，血浆、尿液、唾液、乳汁等各种生理液体中也存在外泌体，且这些外泌体呈现多效性的生物功能，包括免疫调节活性，细胞与细胞交流的调节和传递信号的功能。miRNA作为一类非编码的小分子RNA，可包裹于乳汁的外泌体中。有研究表明，在不同物种乳汁外泌体中都发现存在miRNA，而且miRNA的组成和丰度存在显著差异。

发明内容

为了克服现有技术的缺点与不足，本发明的首要目的在于提供一种区分水牛和奶牛奶的miRNA标记物。

本发明的另一目的在于提供上述miRNA标记物的应用。

本发明的再一目的在于提供一种用于区分水牛和奶牛奶的检测试剂盒。

本发明利用水牛和奶牛乳汁外泌体miR-2285t，提出区分水牛和奶牛奶检测方法及应用，为农业生产中在分子水平上区分水牛和奶牛奶提供了新的鉴定方法。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

本发明提供一种区分水牛和奶牛奶的miRNA标记物，所述的miRNA标记物为miR-2285t，其序列为：5′-agaaucuggaugaacuuuuugg-3′，如SEQ ID NO：1所示。

本发明还提供一种上述miRNA标志物的引物，该序列为：(5′-3′)

miR-2285t的上游引物序列为：ggccagaatctggatga，SEQ ID NO：3；

miR-2285t的下游引物序列为：gtgcagggtccgaggt，SEQ ID NO：4。

本发明还提供一种上述miRNA标记物在区分水牛和奶牛奶中的应用，具体的，在制备区分水牛和奶牛奶检测试剂盒中的应用。

优选的，上述miRNA标志物的引物在区分水牛和奶牛奶中的应用，具体的，在制备区分水牛和奶牛奶检测试剂盒中的应用。

本发明还提供一种用于区分水牛和奶牛奶的检测试剂盒，包括针对所述miR-2285t的引物和/或探针。