本发明属于生物技术领域,具体涉及一种猪子宫内膜来源的外泌体及其提取方法与应用。本发明先分离得到子宫内膜组织,然后剪碎成组织块;冲洗后在20~30℃,80~100g条件下离心3~10min,弃上清液;再将组织块置于Hanks’Balanced Salt Solution中孵育,收集猪子宫内膜培养液;最后采用超速离心法提取外泌体,得到猪子宫内膜来源的外泌体。与现有技术相比,本发明提供的方法更加简单便捷,节约了样品收集的成本,减少了人力的损耗,同时也节约了采样的时间,增加了采样的效率。提取的外泌体在电镜下外泌体形状更加明显,背景干净且无杂质,可以作为促进猪胚胎体外培养效率的添加剂。
本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种血清外泌体ssc‑miR‑92b‑3p作为母猪早期妊娠诊断分子标志物的应用。所述的血清外泌体ssc‑miR‑92b‑3p的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明确定了最早在怀孕的第9天血清中外泌体miRNA的水平变化并确定了在妊娠第9至15天期间ssc‑miR‑92b‑3p表达的水平增加,该miRNA可以作为猪早期妊娠的新的生物标记物。本发明还提供了一种检测上述分子标志物的引物和试剂盒。与现有技术相比,本发明具有早期、方便、快捷、特异和灵敏的特点,从而缩短假孕母猪的空怀期,及早采取复配,有利于生产管理,提高生产效率,为母猪早期妊娠诊断提供了新的途径。
本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种血清外泌体ssc‑miR‑17‑5p作为母猪早期妊娠诊断分子标志物的应用。所述的血清外泌体ssc‑miR‑17‑5p的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。使用该分子标记来检测妊娠状态具有早期、方便、快捷、特异和灵敏的特点,从而缩短假孕母猪的空怀期,及早采取复配,有利于生产管理,提高生产效率。本发明还提供了一种检测上述分子标志物的引物和试剂盒,为母猪早期妊娠诊断提供了新的途径。