[发明专利]利用生防菌剂防治番茄灰霉病的方法

说明书

本发明属于生物技术领域，公开了利用生防菌剂防治番茄灰霉病的方法，其包括如下步骤：将生防菌剂添加到50‑100倍重量的水中，搅拌均匀，置于25‑30℃活化3‑5h，然后按照每株喷洒10‑20ml的量喷洒到番茄上，1周后重复喷洒一次。本发明采用生防制剂对番茄灰霉病进行田间防治，完全没有化学防治所带来的一系列问题，而且防治效果好。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及利用生防菌剂防治番茄灰霉病的方法。

背景技术

番茄灰霉病是番茄生产中的重要病害之一，对保护地番茄生产构成极大威胁。幼苗期和成株期均可发病，花果叶茎均可受害，尤以青果受害最重，一般导致番茄减产30%以上，对番茄的产量和品质影响很大。目前国内各地均有发生，已经成为番茄设施栽培的限制性障碍。目前，由于尚未发现灰霉病的抗源，抗病育种难以进行，番茄灰霉病的防治仍依靠化学药剂进行防治。然而，长期、连续用药使病原菌逐渐产生了抗药性影响了防治效果，同时造成环境污染，也造成了果实的农药污染。因而寻找和筛选对番茄灰霉病菌有强烈抑制作用的微生物菌株，是番茄灰霉病防治的主要方向。利用生物农药替代化学农药防治植物病害虽可避免抗药性病原菌株的产生，但具有防治机理不清楚、防效较慢，效果不稳定等缺点。

生物农药主要是生防菌剂，其作为一种新兴的防治措施，与其他方法相比，具有安全、有效、持久的特点，特别是避免了化学防治带来的一系列问题。生防菌剂防治方法是采用微生物对灰霉进行杀灭，目前已经开始在农业上推广使用，比较常见的的是于发病前或初期使用3亿CFU/克哈茨木霉菌300喷雾，兑水喷雾，每隔5-7天喷施一次，可在一定程度上防治灰霉病的发生。文献“防控番茄灰霉病的化学药剂和生防菌株筛选研究，牛贞福，东北农业科学2016年”，采用化学药剂和生防菌在田间对番茄灰霉病防治效果进行了测试；其中，化学药剂对番茄灰霉病的防效在60-70%之间；生防菌株发酵液对番茄灰霉病的防效范围为45.73-61.09%，防效最高的是木霉。

近年来，生物防治灰霉病方法逐渐成为研究的热点，大量的拮抗微生物被筛选出来加以利用来对灰霉病进行防治。单一菌株往往存在防治效果低下、药效慢等缺陷，目前已经有多个生物农药公司开始研究复合生防制剂。复合生防制剂一般是指包括两种以上的微生物的制剂，选择复合生防制剂中的菌株较为关键，也是难点；如果选择不慎，菌株之间反而会起到相互拮抗的反作用。开发一种利用复合生防菌剂防治番茄灰霉病的方法尤为迫切。

发明内容

为了克服现有技术中化学防治方法容易产生拮抗和污染、单一生防菌剂防治效果差的缺陷，本发明提供了利用生防菌剂防治番茄灰霉病的方法。

本发明是通过如下技术方案来实现的：

利用生防菌剂防治番茄灰霉病的方法，其包括如下步骤：

将生防菌剂添加到50-100倍重量的水中，搅拌均匀，置于25-30℃活化3-5h，然后按照每株喷洒10-20ml的量喷洒到番茄上，1周后重复喷洒一次。

优选地，

所述番茄处于灰霉病发病初期。

具体地，

所述生防菌剂按照如下工艺制备而得：将康氏木霉-丝孢酵母混合发酵液和施氏假单胞菌培养液按照3:2的体积比混合均匀，然后真空冷冻干燥制得菌粉，即得。

优选地，

所述施氏假单胞菌为ATCC 17588；所述康氏木霉为ATCC 66766；所述丝孢酵母为ATCC 201110。

具体地，

所述康氏木霉-丝孢酵母混合发酵液的制备方法包括如下步骤：

1）将丝孢酵母划线接种在YPDA培养基上培养，得到单菌落；挑取单菌落接种到YPD液体培养基上培养，30℃培养24h，得到丝孢酵母种子液，待用；