[发明专利]一种鸡肉中肌苷酸含量液相色谱检测方法

说明书

本发明公开了一种鸡肉中肌苷酸含量液相色谱检测方法，包括以下步骤：第一步，选定原材料；第二步，选定试剂及主要仪器；第三步，配制主要溶液；第四步，原材料处理；第五步，色谱条件设置；第六步，检测结果的分析的计算。本发明流动相中采用的甲酸铵为水溶性弱酸盐，其化学特性可能更有利于延长色谱柱的使用寿命，从而使本方法更适用于大量样品的测定采用甲酸铵缓冲液作为流动相进行反相液相色谱分析，优化了色谱条件，提高了肌肉组织样品中肌苷酸含量测定的精密度和准确性，达到了准确、快速测定肌苷酸含量的目的，可应用于生鲜肉类食品中肌苷酸含量的检测分析。

技术领域

本发明涉及液相色谱检测技术领域，具体为一种鸡肉中肌苷酸含量液相色谱检测方法。

背景技术

肌苷酸(Inosinic acid，IMP)，即次黄嘌呤核苷酸，是动物组织中重要的风味物质，其与畜禽肉类食品鲜味的产生密切相关。目前，肌肉组织中肌苷酸含量被作为肉质评定的重要指标，已广泛应用于各种动物肉类产品的品质评定，其含量的高低可间接反映出肉类食品风味的优劣。为此，肌肉组织中肌苷酸含量测定方法的研究已显得尤为重要。目前测定肌肉组织中肌苷酸含量的方法有薄层层析法、紫外分光光度法和高效液相色谱法等。其中，以磷酸－三乙胺缓冲溶液为流动相的反相液相色谱法已成为当前肌肉组织中肌苷酸含量测定的常用方法。然而，该测定方法的相对标准偏差和回收率在已报道的试验研究中差异较大，反映出该方法可能存在一定的缺陷。因此，本文在总结前人研究的基础上，通过对流动相的改进，旨在探讨肌肉组织中肌苷酸含量测定的精确度和准确性更高的反相液相色谱法，针对上述问题，特提出一种鸡肉中肌苷酸含量液相色谱检测方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种鸡肉中肌苷酸含量液相色谱检测方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种鸡肉中肌苷酸含量液相色谱检测方法，包括以下步骤：第一步，选定原材料；

第二步，选定试剂及主要仪器；

第三步，配制主要溶液；

第四步，原材料处理；

第五步，色谱条件设置；

第六步，检测结果的分析的计算。

所述第一步，选定原材料的具体步骤如下，选取一定量的新鲜肉鸡胸肌样品，并置于-20℃、常压的状态下保存待用。

所述第二步，选定试剂及主要仪器的具体步骤如下，试剂包括：肌苷酸标准品，含量65.32％；甲醇，色谱纯；甲酸铵，分析纯；高氯酸，优级纯，含量 70％～72％，主要仪器包括：液相色谱仪；紫外检测器；高速离心机；高速组织匀浆机；绞肉机。

所述第三步，配制主要溶液的具体步骤如下，所述主要溶液包括甲酸铵缓冲溶液、肌苷酸标准储备液和肌苷酸标准工作液；

甲酸铵缓冲溶液的配制：称3.15g甲酸铵置于烧杯内，并向烧杯内加500ml 去离子水，再向烧杯内倒入0.5mol/L的氢氧化钠溶液，将烧杯内的混合液调至 pH为6.5，定容至1000ml，选用0.45μm滤膜进行过滤，再置入超声水浴内脱气20min；

肌苷酸标准储备液的配制：准确称取15.31mg肌苷酸标准品，用浓度为5％的甲醇水溶液定容至10ml，并且充分摇匀；

肌苷酸标准工作液的配制：取配制好的肌苷酸标准储备液1ml，用浓度为 5％的甲醇水溶液定容至10ml，并且充分摇匀。