[发明专利]一种鸡肉中肌苷酸含量液相色谱检测方法

权利要求书

1.一种鸡肉中肌苷酸含量液相色谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

第一步，选定原材料；

第二步，选定试剂及主要仪器；

第三步，配制主要溶液；

第四步，原材料处理；

第五步，色谱条件设置；

第六步，检测结果的分析的计算。

2.根据权利要求1所述的一种鸡肉中肌苷酸含量液相色谱检测方法，其特征在于：所述第一步，选定原材料的具体步骤如下，选取一定量的新鲜肉鸡胸肌样品，并置于-20℃、常压的状态下保存待用。

3.根据权利要求1所述的一种鸡肉中肌苷酸含量液相色谱检测方法，其特征在于：所述第二步，选定试剂及主要仪器的具体步骤如下，试剂包括：肌苷酸标准品，含量65.32％；甲醇，色谱纯；甲酸铵，分析纯；高氯酸，优级纯，含量70％～72％，主要仪器包括：液相色谱仪；紫外检测器；高速离心机；高速组织匀浆机；绞肉机。

4.根据权利要求1所述的一种鸡肉中肌苷酸含量液相色谱检测方法，其特征在于：所述第三步，配制主要溶液的具体步骤如下，所述主要溶液包括甲酸铵缓冲溶液、肌苷酸标准储备液和肌苷酸标准工作液；

甲酸铵缓冲溶液的配制：称3.15g甲酸铵置于烧杯内，并向烧杯内加500ml去离子水，再向烧杯内倒入0.5mol/L的氢氧化钠溶液，将烧杯内的混合液调至pH为6.5，定容至1000ml，选用0.45μm滤膜进行过滤，再置入超声水浴内脱气20min；

肌苷酸标准储备液的配制：准确称取15.31mg肌苷酸标准品，用浓度为5％的甲醇水溶液定容至10ml，并且充分摇匀；

肌苷酸标准工作液的配制：取配制好的肌苷酸标准储备液1ml，用浓度为5％的甲醇水溶液定容至10ml，并且充分摇匀。

5.根据权利要求1所述的一种鸡肉中肌苷酸含量液相色谱检测方法，其特征在于：所述第四步，原材料处理的具体步骤如下，将肉鸡胸肌样品用绞肉机绞碎后称取5g，准确至0.0001g，置于50ml塑料离心管中，分次加入共20m浓度为l6％的高氯酸，用高速组织匀浆机匀浆，匀浆液以8000r/min的速度离心13min，离心过滤后将上清液置于100ml三角瓶中，将离心后得到的沉淀物用15m浓度为l6％的高氯酸再次进行匀浆、离心，过滤出第二次离心的上清液并倒入三角瓶中，用5.0mol/L和0.5mol/L的NaOH溶液将三角瓶中液体的pH值调至6.5，再将三角瓶内的溶液转移至100ml容量瓶中，定容并且充分摇匀，用0.45μm滤膜过滤后制得样品提取液备用。

6.根据权利要求1所述的一种鸡肉中肌苷酸含量液相色谱检测方法，其特征在于：所述第五步，色谱条件设置的具体步骤如下，色谱柱：WatersAtlantisTMdC18柱(5μm，Φ4.6mm×150mm)；流动相：50mmol/LpH6.5甲酸铵缓冲溶液(含5％甲醇)；流速：1ml/min；柱温：25℃；进样量：5μl；紫外检测波长：254nm；运行时间：肌苷酸标准工作液运行4min，样品提取液运行11min。

7.根据权利要求1所述的一种鸡肉中肌苷酸含量液相色谱检测方法，其特征在于：所述第六步，检测结果的分析的计算的具体步骤如下，将样品提取液和肌苷酸标准工作液在设置的色谱条件下进行分析，根据两种溶液峰面积响应值计算出原材料中肌苷酸的含量。