[发明专利]玉米C型细胞质雄性不育育性恢复基因Rf4位点紧密连锁分子标记及其应用

说明书

本发明属于基因辅助选择技术领域，具体涉及一种玉米C型细胞质雄性不育育性恢复基因Rf4位点紧密连锁分子标记，X‑21‑1和X33的核苷酸序列分别如SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示，其扩增引物包括以下引物对：X‑21‑1F：5’‑TTTCTTCTCAGGGTGGTCTTGC‑3’，X‑21‑1R：5’‑CACCTTTCCACCTCGCCTATT‑3’；X33F：5’‑CACACACGAGGGGAGGAGGT‑3’，X33R：5’‑AAGGTCTTTGTTGTCGGGCA‑3’。本发明分子标记可对Rf4位点进行辅助选择，用于不育化制种，节省大量的人力、物力，加快了恢复系的转育。

技术领域

本发明属于基因辅助选择技术领域，具体涉及一种玉米C型细胞质雄性不育育性恢复基因Rf4位点紧密连锁分子标记及其应用。

背景技术

玉米是世界上三大粮食作物之一，在社会发展中占有重要地位。近年来，杂种优势的应用使得玉米产量有了大幅的提高，而细胞质雄性不育（CMS）的利用则是实现杂种优势利用的一条有效途径。雄性不育的利用在降低生产成本，提高种子纯度等方面起到了积极的作用。玉米细胞质雄性不育(male sterility)是指玉米在生长发育过程中雄穗不能产生正常的花药、花粉或雄配子，而雌穗发育正常，能接受正常花粉而受精结实的遗传现象。表现雄性不育的植株，其雄配子在形成过程中由于受某种生理机理的调控，导致雄配子的败育，而雌配子发育正常，所以只有被授以其它植株的正常花粉才能完成正常的受精结实。因此，植物的雄性不育在配制杂交种、利用杂种优势上具有重要价值。玉米属于雌雄同株，常异花授粉作物，天然异交率在90%以上，所以在用可育亲本配制玉米杂交种时，需要进行人工去雄。如果去雄不及时、不彻底，就会导致种子混杂。利用玉米细胞质雄性不育系配制杂交种，不仅可以提高种子纯度、降低种子生产成本，还可以提高杂交种的产量、增加对抗病性的遗传弹性。

分子标记辅助选择（Marker-assisted selection，MAS）是指利用分子标记对目的基因或性状进行选择。分子标记辅助选择不受时间和环境条件的限制，可以直接对性状的基因型进行选择，提高了育种效率，缩短了育种进程，因而越来越受到育种工作者的重视和应用。

发明内容

针对上述问题，本发明提供一种分子标记，其与玉米C型细胞质育性恢复基因Rf4位点紧密连锁，可对其进行辅助选择，用于不育化制种，节省大量的人力、物力，加快了恢复系的转育。

为解决以上技术问题，本发明通过以下技术方案实现：

本发明玉米C型细胞质雄性不育育性恢复基因Rf4位点，位于玉米第8号染色体，该基因位点能完全恢复C型细胞质雄性不育系的育性。与该恢复基因Rf4位点紧密连锁的分子标记为X-21-1 (SEQ ID No.5)和X33 (SEQ ID No.6)，分别位于第8号染色体165378bp-165543bp和227404bp-227499bp。

进一步的，所述分子标记X-21-1的扩增引物为：

X-21-1F：5’-TTTCTTCTCAGGGTGGTCTTGC-3’ (SEQ ID No.1)

X-21-1R：5’-CACCTTTCCACCTCGCCTATT-3’ (SEQ ID No.2)。

进一步的，所述分子标记X33的扩增引物为：

X33F：5’-CACACACGAGGGGAGGAGGT-3’ (SEQ ID No.3)

X33R：5’-AAGGTCTTTGTTGTCGGGCA-3’ (SEQ ID No.4)。