[发明专利]猫ω2干扰素突变体及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种猫ω2干扰素突变体及其制备方法和应用，属于猫ω2干扰素的制备及应用领域。本发明经过比对猫ω干扰素13个亚型的基因序列及氨基酸序列，对猫ω2干扰素进行氨基酸定点突变，获得猫ω2干扰素突变体。本发明进一步公开了制备所述猫ω2干扰素突变体的方法，包括：猫ω2基因进行点突变，并对突变基因进行优化，将编码猫ω2干扰素突变体的基因克隆到杆状病毒转移载体中与杆状病毒重组感染昆虫宿主，表达外源基因，获得猫ω2干扰素蛋白表达产物，通过突变可使猫ω2干扰素的抗病毒活性提高45％以上，对基因进行优化和突变可使猫ω2干扰素的抗病毒活性提高96％以上。本发明方法工艺简单，可高效、稳定地获得能安全使用的猫ω2干扰素，其抗病毒活性呈显著提升。

本申请是申请号为201510197296.5，申请日为2015年4月23日，发明名称为“猫ω干扰素突变体及其制备方法和应用”的母案申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及猫ω干扰素，尤其涉及猫ω2干扰素突变体，本发明还涉及所述猫ω2干扰素突变体的制备方法及其在制备预防或治疗猫病毒性疾病的药物或试剂中的用途，属于猫ω2干扰素的制备及应用领域。

背景技术

干扰素(Interferon，IFN)是在特定的诱生剂的作用下，由细胞产生的一种具有高度生物活性的糖蛋白，在本动物细胞中具有广谱抗病毒活性。目前已知干扰素并非直接杀伤病毒，而是通过诱导宿主本身的细胞产生多种酶来干扰病毒的基因转录或者病毒蛋白组分的翻译。干扰素根据产生的细胞来源不同、理化性质和生物学活性差异等方面可以分为Ⅰ型和Ⅱ型IFN；Ⅰ型IFN主要包括IFN-α、β、ω、δ、κ、ε、ζ和τ等，Ⅱ型IFN只有IFN-γ一种(CannAJ.Principles of Molecular Virology.Beijing：Science Press，2006:177-178)。

目前已知的具有ω干扰素的物种有人、猫、马、羊、牛、猪、兔等。猫作为一种传统宠物在中国的养殖量非常大，其传染病尤其是猫瘟、猫传染性鼻气管炎和猫杯状病毒感染等病毒性疾病的发生越来越严重。目前还没有一种治疗病毒性疾病的特效药，迫切需要优质、廉价的猫干扰素产品上市，但目前猫干扰素的表达量不高，抗病毒活性不强。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种猫ω2干扰素突变体和猫ω11干扰素突变体，所述猫ω干扰素突变体具有高抗病毒活性；

本发明所要解决的另一个技术问题是提供一种利用家蚕杆状病毒表达系统制备所述猫ω2干扰素突变体或猫ω11干扰素突变体的方法；

本发明所要解决的第三个技术问题是提供所述猫ω2干扰素突变体或猫ω11干扰素突变体在制备预防或治疗猫病毒性疾病的药物或试剂中的用途。

为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：

本发明首先公开了一种猫ω2干扰素突变体，其氨基酸序列为SEQ ID NO.2或SEQID NO.10所示。编码所述猫ω2干扰素突变体的基因，其核苷酸序列为SEQ ID NO.4、SEQ IDNO.5、SEQ ID NO.11或SEQ ID NO.12所示。

本发明还公开了一种猫ω11干扰素突变体，其氨基酸序列为SEQ ID NO.7所示。编码所述猫ω11干扰素突变体的基因，其核苷酸序列为SEQ ID NO.8或SEQ ID NO.9所示。

猫ω2干扰素突变前氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示，其基因序列为SEQ ID NO.3所示；猫ω11干扰素突变前氨基酸序列为SEQ ID NO.6所示。