[发明专利]一种心脏肌球衍生细胞在生物材料中的应用

说明书

本发明具体公开了一种心脏肌球衍生细胞在生物材料中的应用；包括以下步骤：S1.心脏肌球衍生细胞(CDCs)的培养；S2.血小板纤维蛋白支架的制备；S3.血小板纤维蛋白支架的观察；S4.心脏肌球衍生细胞‑血小板纤维蛋白支架联合移植。表明血小板纤维蛋白支架中联合CDCs能够更好地纠正心肌梗死后心脏功能；同时血小板纤维蛋白支架与CDCs之间能够相互促进，联合移植后能够再生更多的血管内皮细胞、心肌细胞，增加梗死部位血管密度，募集更多的干细胞进入梗死区域发挥再生功能，从而逆转负性心肌重塑，改善心脏功能。

技术领域

本发明涉及心脏移植模型技术领域，具体地，涉及一种心脏肌球衍生细胞在生物材料中的应用。

背景技术

心肌梗死和心功能衰竭是中西方国家的人类主要死亡原因之一，且严重增加了社会经济负担。尽管药物开发和介入治疗有了很大发展，却仍然无法降低心肌梗死所致心功能衰竭总的死亡率和发病率，究其原因，一方面是梗死后大量的心肌细胞死亡，容易出现心脏功能严重衰竭或发生恶性心律失常，最终导致患者死亡；而另一方面药物和介入治疗的干预使相当一部分急性心肌梗死患者虽存活下来，但是死亡的细胞没有新生细胞代替其功能，当残存心肌细胞失代偿时，左心室乃至全心功能严重受损。因此寻找合适的途径替代损失的心肌或者促进再生在改变预后方面有着重要的意义。

心脏组织工程和生物材料的应用主要依赖于人工合成材料或天然材料，经过合适的途径重组形成具有舒缩功能的心肌样组织，支撑功能衰竭的心脏。在所有材料中，可注射用生物材料具有非常突出的优点。可注射用生物材料联合干细胞，如骨髓细胞、脂肪源干细胞和骨髓源性诱导心脏细胞被证实能够改善心脏的功能。近年来，随着对CSCs认识的不断加深，很多研究认为其具有组织再生的功能，在体内能够分化成为多种类型的成熟细胞，如心肌细胞、血管内皮细胞等，因此引起了普遍关注。

发明内容

本发明为了克服现有技术的上述不足，提供一种心脏肌球衍生细胞在生物材料中的应用。

为了实现上述目的，本发明是通过以下技术方案予以实现的：

目前，对于缺血性心脏病的治疗大都是基于病因的干预性治疗，它们在替代死亡心肌细胞的功能及修复梗死后心肌方面的作用有限。干细胞移植是治疗缺血性心脏病的新方法之一，用于缺血性心脏病治疗的理想种子细胞最好无免疫原性，具有易收获、能在体外大量扩增、能在心脏微环境中很好地成长的特性，并能够促进受损心脏的修复。近年来，大量具有说服力的证据表明，心脏中存在有干细胞池，如果能够从受体自身心脏中获得干细胞，自然不存在免疫原性和不适应心脏微环境的情况，可能具有很好的治疗前景，而心脏肌球细胞(CSp)和心脏肌球衍生细胞(CDCs)(心脏中存在的、含有心脏干细胞的混合细胞集团)，其作为缺血性心脏病治疗的选择值得探讨。

一种心脏肌球衍生细胞在生物材料中的应用，所述生物材料为一种心脏移植模型。

以上所述的心脏肌球衍生细胞在心脏移植模型中的应用，包括以下步骤：

S1.心脏肌球衍生细胞(CDCs)的培养；

S2.血小板纤维蛋白支架的制备；

S3.血小板纤维蛋白支架的观察；

S4.心脏肌球衍生细胞-血小板纤维蛋白支架联合移植。

优选地，所述步骤S1中的心脏肌球衍生细胞(CDCs)的培养包括以下步骤：取健康的清洁级雌性8周龄WKY大鼠心肌组织，利用组织块培养法收获细胞，再通过悬浮培养和(或)贴壁培养方式获得大鼠心脏肌球衍生细胞，在体外观察细胞形态，持续传代观察细胞活性，绘制细胞生长曲线；利用流式细胞术检测不同来源和不同培养代数的的表面标志物VEGF、IGF-1、SDF-1以及细胞的表达。

优选地，所述步骤S2的血小板纤维蛋白支架的制备，还包括以下步骤：

S1.使用异氟醚深度麻醉大鼠；