[发明专利]B型流感病毒分型鉴定用引物探针和鉴定方法在审
| 申请号： | 201810086232.1 | 申请日： | 2018-01-29 |
| 公开（公告）号： | CN108179224A | 公开（公告）日： | 2018-06-19 |
| 发明（设计）人： | 朱兆奎;李晓丹;赵百慧 | 申请（专利权）人： | 上海伯杰医疗科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人： | 庄文莉 |
| 地址： | 201321 上海市浦*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 分型鉴定 引物探针 基因保守区域 临床流行病学 呼吸道感染 反应条件 探针选择 我国大陆 荧光标记 荧光 探针 引物 样本 感染 应用 研究 | ||
1.一种rRT-PCR引物和探针组合，其特征在于，包括针对B型流感病毒Victoria系的序列如SEQ ID No.1～SEQ ID No.2所示的引物对和序列如SEQ ID No.3所示的探针，以及针对B型流感病毒Yamagata系的序列如SEQ ID No.1～SEQ ID No.2所示的引物对和序列如SEQ ID No.4所示的探针。
2.根据权利要求1所述的rRT-PCR引物和探针组合，其特征在于，针对B型流感病毒Victoria系的探针两端的标记为FAM、BHQ1荧光素标记；针对B型流感病毒Yamagata系的探针两端的标记为HEX、BHQ1荧光素标记。
3.一种B型流感病毒分型鉴定用试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如权利要求1或2所述的rRT-PCR引物和探针组合。
4.如权利要求3所述的B型流感病毒分型鉴定用试剂盒，其特征在于，所述试剂盒用于：
鉴定或辅助鉴定待测病毒为B型流感病毒Victoria系或Yamagata系；
或鉴定待测样本是否感染了B型流感病毒Victoria系或Yamagata系。
5.一种如权利要求1或2所述的rRT-PCR引物和探针组合的应用，包括：
鉴定或辅助鉴定待测病毒为B型流感病毒Victoria系或Yamagata系；
或制备用于鉴定或辅助鉴定待测病毒为B型流感病毒Victoria系或Yamagata系的试剂盒；
或鉴定待测样本是否感染了B型流感病毒Victoria系或Yamagata系；
或制备用于鉴定待测样本是否感染了B型流感病毒Victoria系或Yamagata系的试剂盒。
6.一种应用如权利要求1或2所述的rRT-PCR引物和探针组合进行B型流感病毒分型鉴定的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
S1、利用核酸提取试剂从待测流感病毒样本中提取RNA；
S2、加入所述引物和探针组合进行一步法rRT-PCR核酸扩增反应；
S3、根据Ct值判断是否是B型流感病毒核酸阳性，并根据阳性结果荧光标记的不同判断是Victoria系还是Yamagata系。
7.根据权利要求6所述的分型鉴定的方法，其特征在于，步骤S3中，Ct值小于38的判断为阳性。
8.根据权利要求6所述的分型鉴定的方法，其特征在于，步骤S3中，FAM通道阳性的可判断分型结果为B型流感病毒Victoria系；HEX通道阳性的可判断分型结果为B型流感病毒Yamagata系。
9.根据权利要求6所述的分型鉴定的方法，其特征在于，所述一步法rRT-PCR核酸扩增反应的反应条件为：45℃，10分钟，1个循环；95℃，2分钟，1个循环；95℃，5秒，60℃，20秒，40个循环。
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