[发明专利]一种发酵制备达托霉素的方法

权利要求书

1.一种发酵制备达托霉素的方法，该方法包含向发酵培养基中分别流加癸酸前体化合物的步骤，其特征在于所述癸酸前体化合物为癸酸盐和癸酸。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述癸酸与耦合剂耦合，所述耦合剂选自油酸甲酯、乙醇、氨水，优选油酸甲酯。

3.据据权利要求2所述的方法，其特征在于所述癸酸与耦合剂的比例为1:0.5～2.5，优选1:1。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的癸酸盐选自癸酸钠、癸酸钾、癸酸铵，优选癸酸钠。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述的癸酸盐的浓度5％～15％w/v，优选8％～12％w/v，最优选10％w/v。

6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于癸酸前体化合物的添加顺序依次为：发酵至18～30h时，开始流加癸酸盐溶液；发酵至28～42h时，保持癸酸盐流加，开始以第一速率流加癸酸-耦合剂；发酵至68～80h时，停止流加癸酸盐，癸酸-耦合剂的流加调节至第二速率，直至发酵结束。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述癸酸盐流加速率为0.01～0.15g/L/h，优选0.03～0.10g/L/h，最优选0.06g/L/h。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述癸酸-耦合剂第一速率为0.05～0.20mL/L/h，优选0.10～0.14mL/L/h，最优选0.12mL/L/h，第二速率为0.15～0.30mL/L/h，优选0.22～0.26mL/L/h，最优选0.24mL/L/h。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于自发酵开始流加碳源直至发酵结束。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于所述碳源选自葡萄糖、乳糖、糖蜜、麦芽糊精、淀粉、山梨醇的一种或几种，优选葡萄糖。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于所述碳源的溶液浓度为30％～70％w/v，优选40％～60％w/v，优选50％w/v。

12.根据权利要求11所述的方法，其特征在于所述碳源自发酵开始以第一速率流加，发酵至23～35h时，调节至第二速率流加，其中第一速率为0.20～0.45mL/L/h，优选0.30～0.38mL/L/h，最优选0.34mL/L/h，第二速率为0.30～0.60mL/L/h，优选0.39～0.47mL/L/h，最优选0.43mL/L/h。

13.根据权利要求11所述的方法，其特征在于发酵至23～35h时，开始流加氮源，直至发酵结束。

14.根据权利要求13所述的方法，其特征在于所述氮源选自酵母粉、黄豆饼粉、棉籽饼粉、玉米蛋白粉、氨盐的一种或几种，优选酵母粉。

15.根据权利要求14所述的方法，其特征在于所述氮源的流加速率为0.01～0.20g/L/h，优选0.05～0.15g/L/h，最优选0.10g/L/h。

16.根据权利要求1-15任一项所述的方法，其特征在于所述发酵培养基含有碳源、氮源、无机盐，所述碳源为选自葡萄糖、乳糖、糖蜜、麦芽糊精、淀粉、山梨醇中的一种或几种，所述氮源为选自酵母粉、黄豆饼粉、棉籽饼粉、玉米蛋白粉、氨盐中的一种或几种；所述的无机盐为选自Na盐、K盐、Ca盐、Mg盐、Fe盐、Mn盐、Zn盐、Co盐或Ni盐的一种或几种。

17.根据权利要求16所述的方法，其特征在于所述发酵培养基还可以含有氨基酸类、维生素和/或核酸类物质。