[发明专利]一种中药饮片卡那霉素抗体的配方及制备工艺

权利要求书

1.一种中药饮片卡那霉素抗体的配方，其特征在于，按照重量份数由如下原料组成：

硫酸卡那霉素58-80份、牛血清白蛋白5-25份、卵清白蛋白3-5份、弗氏完全佐剂3-5份、弗氏不完全佐剂3-5份、碳二亚胺3-5份、戊二醛1-2份、羊抗鼠酶标二抗1-3份、磷酸氢二钠2-3份、醋酸钠8-10份、十二烷基磺酸钠15-20份、考马斯亮蓝R-25010-15份、过氧化脲8-12份、乙醇6-11份、甲醛5-7份、硼氢化钠8-13份、甲醇1-3份、浓硫酸1-3份、磷酸盐缓冲液5-7毫升、包被用碳酸盐缓冲液CBS0.5升、洗涤液PBST0.5升、封闭液5％猪血清0.25升，ELISA试验显色液0.5升、ELISA试验终止液1升。

2.根据权利要求1所述的一种中药饮片卡那霉素抗体的配方，其特征在于，所述ELISA试验显色液必须现用现配，由两种试剂(试剂一、试剂二)等体积混合而成；

试剂一：取150mL0.1mol的柠檬酸与850mL等摩尔浓度的醋酸钠混合，在此混合液中加入0.5g的过氧化脲，充分溶解后再在混合液中加入0.08g非那西汀，混匀，于4℃保存。

试剂二：准确称取1.27g四甲基联苯胺，加热搅拌使其充分溶于甲醇溶液中，再将混合液加入500mL甘油中，充分混合4℃保存备用。

3.根据权利要求1所述的一种中药饮片卡那霉素抗体的配方，其特征在于，所述ELISA试验终止液配置：取约43mL浓硫酸，缓慢加入356.5mL去离子水中边加边搅拌，制成2mol/L的硫酸溶液，室温保存备用。

4.根据权利要求1所述的一种中药饮片卡那霉素抗体的配方，其特征在于，所述封闭液5％猪血清在4℃条件下保存备用。

5.根据权利要求1所述的一种中药饮片卡那霉素抗体的配方，其特征在于，所述乙醇的纯度为30％。

6.一种中药饮片卡那霉素抗体的制备工艺，其特征在于，包括如下步骤：

(1)准确称取牛血清白蛋白20mg，碳二亚胺55mg，使之充分溶解于2mL0.01M的PBS中，得到反应液为A液；

(2)按配方进行配料，准确称取卡那霉素标准品50mg，加入1.5mL0.01M的PBS中，边加边搅拌，使之充分溶解后所得溶液称为B液；

(3)将上述B液逐滴加入A液中(边加入边搅拌)，密封，避光，在4℃下搅拌过夜；

(4)待上述反应完后，将反应液转移到处理好的透析袋中，在4℃环境下用0.01M的PBS透析3天。

7.根据权利要求6所述的一种中药饮片卡那霉素抗体的制备工艺，其特征在于，所述步骤(1)中，反应液在0.01M的PBS中在4℃环境下避光搅拌反应6h。

8.根据权利要求6所述的一种中药饮片卡那霉素抗体的制备工艺，其特征在于，所述步骤(4)中，反应液的透析分为四段，恒温透析、换液透析、和降温透析。

9.根据权利要求6所述的一种中药饮片卡那霉素抗体的制备工艺，其特征在于，所述恒温透析是将温度调至4℃，并保持恒定；所述换液透析是指透析液需要每间隔一定的时间进行换液，在透析第一天每3h换液一次，以后每8-10h换液一次；所述降温透析是指在透析完成后，将偶联产物分装于1.5ml离心管中，将温度降至-20℃保存备用。