[发明专利]制备天然杀伤T(NKT)细胞刺激性树突细胞的方法及制备含有NKT细胞刺激性树突细胞和NKT细胞的细胞组合物的方法在审
| 申请号： | 201780059547.0 | 申请日： | 2017-08-31 |
| 公开（公告）号： | CN109844100A | 公开（公告）日： | 2019-06-04 |
| 发明（设计）人： | 野口活夫;只木敏雅 | 申请（专利权）人： | 株式会社理研免疫再生医学 |
| 主分类号： | C12N5/0784 | 分类号： | C12N5/0784;C12N5/0783;C12N5/0786 |
| 代理公司： | 北京三友知识产权代理有限公司 11127 | 代理人： | 张培源;庞东成 |
| 地址： | 日本*** | 国省代码： | 日本;JP |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 培养容器 树突细胞 沉降 制备 未成熟树突细胞 单个核细胞 成熟树突细胞 细胞刺激性 细胞组合物 细胞 单核细胞 神经酰胺 悬浮细胞 半乳糖 杀伤 去除 诱导 分化 成熟 申请 | ||
1.一种制备天然杀伤T(NKT)细胞刺激性树突细胞的方法，该方法包括以下步骤：
将单个核细胞置于培养容器内并保持该培养容器静置，从而使得所述单个核细胞中的一些附着于所述容器的底表面；
将除已附着于所述培养容器的底表面的细胞以外的悬浮细胞去除；
向所述培养容器内添加预定的因子，从而使已附着于所述底表面的细胞中的单核细胞分化成未成熟树突细胞；
向所述培养容器内添加预定的因子，从而使所述未成熟树突细胞成熟；和
向所述培养容器内添加α-半乳糖神经酰胺，从而从成熟树突细胞诱导NKT细胞刺激性树突细胞。
2.如权利要求1所述的制备NKT细胞刺激性树突细胞的方法，其中，所述方法还包括将获得的NKT细胞刺激性树突细胞冷冻保存。
3.一种制备含有NKT细胞刺激性树突细胞和NKT细胞的细胞组合物的方法，该方法包括：
将单个核细胞置于第一培养容器内并保持第一培养容器静置，从而使得所述单个核细胞中的一些附着于所述容器的底表面；
收集并保存除已附着于所述容器的底表面的细胞以外的悬浮细胞；
向第一培养容器内添加预定的因子，从而使已附着于所述底表面的细胞中的单核细胞分化成未成熟树突细胞；
向第一培养容器内添加预定的因子，从而使所述未成熟树突细胞成熟；
向第一培养容器内添加α-半乳糖神经酰胺，从而从成熟树突细胞诱导NKT细胞刺激性树突细胞；和
将所述NKT细胞刺激性树突细胞和所保存的悬浮细胞置于第二培养容器中并培养细胞，从而从所述悬浮细胞中的一些诱导NKT细胞。
4.如权利要求3所述的制备含有NKT细胞刺激性树突细胞和NKT细胞的细胞组合物的方法，其中，所述方法还包括将含有所获得的NKT刺激性细胞和NKT细胞的细胞组合物冷冻保存。
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