[发明专利]一种可稳定保存的肺癌甲基化基因检测试剂盒的质控品及应用

权利要求书

1.一种DNA保存液，其特征在于，由金精三甲酸铵盐、甘氨酸和苯丁抑制素盐酸盐组成；且所述金精三甲酸铵盐、甘氨酸和苯丁抑制素盐酸盐的摩尔比为（100~500）：（50000~150000）：（0.02~0.06）。

2.根据权利要求1所述的DNA保存液，其特征在于，所述金精三甲酸铵盐、甘氨酸和苯丁抑制素盐酸盐的摩尔比为300：80000：0.04。

3.根据权利要求1~2任一项所述的DNA保存液在DNA保存中的用途。

4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，所述DNA保存液用于制备甲基化基因检测试剂盒的质控品。

5.一种可稳定保存的肺癌甲基化基因检测试剂盒的质控品，其特征在于，所述质控品包含以下组分：阳性参考品、阴性参考品和检测限参考品；

所述阳性参考品包含目标基因发生甲基化修饰的DNA和权利要求1所述的DNA保存液；

所述阴性参考品包含目标基因未发生甲基化修饰的DNA和权利要求1所述的DNA保存液；

所述检测限参考品包含目标基因发生甲基化修饰的DNA、目标基因未发生甲基化修饰的DNA和权利要求1所述的DNA保存液，且所述目标基因发生甲基化修饰的DNA占DNA总量的质量比为1~5%。

6.根据权利要求 5 所述的可稳定保存的肺癌甲基化基因检测试剂盒的质控品，其特征在于，所述质控品包含目标基因p16、RASSF1A、CDH1和CDH13基因质控品中的至少一种。

7.根据权利要求5所述的可稳定保存的肺癌甲基化基因检测试剂盒的质控品，其特征在于，所述阳性参考品、阴性参考品和检测限参考品中DNA保存液的组分金精三甲酸铵盐摩尔浓度为100-500μM，甘氨酸摩尔浓度为50-150mM，苯丁抑制素盐酸盐摩尔浓度为20-60nM。

8.根据权利要求7所述的可稳定保存的肺癌甲基化基因检测试剂盒的质控品，其特征在于，所述阳性参考品、阴性参考品和检测限参考品中DNA保存液的组分金精三甲酸铵盐摩尔浓度为300μM，甘氨酸摩尔浓度为80mM，苯丁抑制素盐酸盐摩尔浓度为40nM。

9.根据权利要求5~8任一项所述的可稳定保存的肺癌甲基化基因检测试剂盒的质控品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）阳性参考品的制备：①选取已鉴定为目标基因发生甲基化修饰的肺癌组织样本，提取DNA并进行亚硫酸氢盐修饰与纯化；②按比例向纯化的DNA溶液中加入权利要求1所述DNA保存液，即得；

（2）阴性参考品的制备：①选取已鉴定目标基因未发生热点甲基化修饰的肺癌组织样本，提取 DNA 并进行亚硫酸氢盐修饰与纯化；②按比例向纯化的DNA溶液中加入权利要求1所述DNA保存液，即得；

（3）检测限参考品的制备：①将所述阳性参考品DNA和阴性参考品DNA混合，使所述阳性参考品DNA占总DNA的质量比为1~5%；②按比例向纯化的DNA溶液中加入权利要求1所述DNA保存液，即得。

10.根据权利要求5~8任一项所述的可稳定保存的肺癌甲基化基因检测试剂盒的质控品在监测肺癌甲基化基因检测试剂盒准确性和稳定性中的用途。